2012 Fiscal Year Research-status Report

若年発症１型糖尿病に対する再生膵島移植―膵島細胞シートの異種移植

Research Project

Project/Area Number	23591871
Research Institution	Fukushima Medical University
Principal Investigator	石井証福島県立医科大学, 医学部, 助教 (40468129)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	伊勢一哉福島県立医科大学, 医学部, 講師 (90363746) 清水裕史福島県立医科大学, 医学部, 助教 (70553709)
Keywords	細胞シート / I型糖尿病 / 膵島移植 / 膵島再生 / ティッシュエンジニアリング / 異種移植
Research Abstract	我々は、膵島移植研究において、既に、ティッシュエンジニアリングの手法を取り入れた膵島細胞シートを発明している(Biomaterials. 30:5943-9,2009)。膵島をsingle cellとし、温度応答性培養皿と細胞間マトリックスであるラミニンを用いることにより、シート状に再構築を可能とした。さらにin vitroにおいてはインスリン分泌機能を持つ事を明らかにしており、in vivoにおいても同系ラット及び同系マウスに移植を行い、血糖値を正常化させている。前年度は、膵島細胞シートの臨床応用へ向けて、異種移植の系で、移植片の拒絶反応について組織学的分析を行った。実験１として、Wistarラットの膵島細胞シートを作成し条件を設定した。実験２として、膵島細胞シートを異種B6マウスに移植し、移植部位での膵島細胞シートの形態と機能に関して観察した。本年度は、免疫寛容の誘導を目的として、マイトマイシン処置による生着延長効果について検討した。実験３として、MMCで免疫寛容を誘導した膵島細胞シートを同種マウスに移植し、移植部位での膵島細胞シートの形態と機能に関して観察した。ドナー不足や脳死医療が進まない日本の社会において、本研究は、ブタ膵島を用いた異種移植が臨床応用される時代の到来を見据えた研究として意義の持つものである。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason WistarラットからB6マウスへの異種移植の際、マイトマイシン処置後膵島で作成した細胞シートを使用し、血糖を低下がみられたが、正常化おとび生着期間の延長はみられなかった。
Strategy for Future Research Activity	免疫応答の評価を行う。Wistarラットからの膵島細胞シートを、ストレプトゾトシンで糖尿病を誘発B6マウスへの皮下、腹膜前腔、腎被膜に移植し、移植後定期的に血糖測定を行う。血糖の再上昇がみられた時点の移植片を摘出し、免疫染色にて観察する。炎症反応、機械的刺激の有無、インスリン分泌能等を比較し、引き続き大動物膵島移植実験を行う際の参考にする。
Expenditure Plans for the Next FY Research Funding	膵島細胞シート作成、異種移植、免疫染色を行う。また、研究報告を行う。