食道がん細胞株におけるｍｉＲ－１２８ｂ機能解析

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23591943
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 三井 章 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (10405178)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 塩崎 みどり 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90531004) ; 柴田 孝弥 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90592501)
• Keywords: lipofection / RT-PCR / western blot / 移植

Research Abstract

miR-128の発現は様々な悪性腫瘍において認められており、転移と関与している可能性もあると報告されている．
以前に当教室では、食道扁平上皮癌の切除標本から抽出したRNAを用いたPCRの結果と臨床データから、miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に関与している可能性があることを報告した．今回、miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に影響する機序の調査において、われわれは細胞の移動に関与するとされるAktの基質Girdinに着目し、食道扁平上皮癌におけるGirdinの働きを研究した．
Girdinに対する抗体を用いた免疫蛍光染色では、EGFで食道扁平上皮癌細胞株を刺激すると、細胞は葉状仮足を形成し、その先端にF-actinとGirdinの集積が認められた．Girdinにはactinとの結合部位があるため、上記結果からは、actinと結合したGirdinが細胞の進行方向に集積することで葉状仮足を形成する可能性があると考えられた．
次に食道扁平上皮癌細胞株を用いたBoyden chamber assayで、Girdinと食道扁平上皮癌細胞の移動能との関係について評価した．siRNAでGirdinをknockdownすると、有意に食道扁平上皮癌細胞の移動能は低下した．
食道扁平上皮癌の手術標本を用いた実験も施行した．食道扁平上皮癌の腫瘍より抽出したGirdinのRNAは、食道の正常粘膜より抽出したGirdinのRNAよりも有意に高値であった．また臨床データとの関連では、食道扁平上皮癌の手術患者をGirdinの高発現群と低発現群に分けると、癌の深達度はGirdinの高発現群で有意に深く、予後もGirdinの高発現群で有意に不良であった．
以上より、Girdinは食道扁平上皮癌細胞の移動に関与している可能性があると考えられた．また臨床においても、Girdinは食道扁平上皮癌の浸潤能を高めることで食道扁平上皮癌の予後を悪化させる可能性があることが示唆された．

Research Products

• [Journal Article] Zerumbone inhibits tumor angiogenesis via NF-κB in gastric cancer. (2014)
  • Author(s): Tsuboi K, Matsuo Y, Shamoto T, Shibata T, Koide S, Morimoto M, Guha S, Sung B, Aggarwal BB, Takahashi H, Takeyama H.
  • Journal Title: Oncol Rep Volume: 31 Pages: 51-64
  • DOI: 10.3892/or.2013.2842
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Girdin, a regulator of cell motility, is a potential prognostic marker for esophageal squamous cell carcinoma. (2013)
  • Author(s): Shibata T, Matsuo Y, Shamoto T, Hirokawa T, Tsuboi K, Takahashi H, Ishiguro H, Kimura M, Takeyama H, Inagaki H.
  • Journal Title: Oncol Rep Volume: 29 Pages: 2127-32
  • DOI: 10.3892/or.2013.2406
  • Peer Reviewed
• [Presentation] PTEN down-regulates the VEGF expression and angiogenesis in pancreatic cancer. (2013)
  • Author(s): Matsuo Y, Shibata T, Tsuboi K, Shamoto T, Nagasaki T, Morimoto M, Ochi N, Takahashi H, Ishiguro H, Funahashi H, Sato M, Okada Y, Takeyama H.
  • Organizer: IAP&KPBA 2013
  • Place of Presentation: Sheraton Grande Walkerhill Hotel(Seoul, Korea)
  • Year and Date: 20130904-20130907
• [Presentation] Xanthohumol inhibits angiogenesis through VEGF and IL-8 in pancreatic cancer. (2013)
  • Author(s): Shamoto T, Matsuo Y, Shibata T, Tsuboi K, Takahashi H, Funahashi H, Okada Y, Takeyama H.
  • Organizer: IAP&KPBA 2013
  • Place of Presentation: Sheraton Grande Walkerhill Hotel(Seoul, Korea)
  • Year and Date: 20130904-20130907
• [Presentation] PKD regulates VEGF secretion in gastric cancer. (2013)
  • Author(s): Tsuboi K, Matsuo Y, Shamoto T, Shibata T, Wakasugi T, Funahashi H, Kimura M, Takeyama H.
  • Organizer: 10th IGCC 2013
  • Place of Presentation: Centro Congressi Palaexpo Veronafiere(Verona, Italy)
  • Year and Date: 20130619-20130622
• [Presentation] 食道癌における次世代シークエンサーを用いたターゲットシークエンス解析 (2013)
  • Author(s): 石黒秀行、木村昌弘、舟橋 整、松尾洋一、安藤拓也、小川 了、塩﨑みどり、柴田孝弥、齋藤慎一郎、竹山廣光
  • Organizer: 第67回日本食道学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪府）
  • Year and Date: 20130613-20130614
• [Presentation] 胎便性イレウスで発症したCystic Fibtosisの1例 (2013)
  • Author(s): 佐藤陽子、榊原堅式、上田悟郎、渡邊拓弥、鈴木卓弥、新井根洋、長縄康浩、杉戸伸好、杉浦博士、三井 章、中前勝視、桑原義之
  • Organizer: 第50回日本小児外科学会学術集会
  • Place of Presentation: 京王プラザホテル（東京都）
  • Year and Date: 20130530-20130601
• [Presentation] Growth arrest and DNA damage inducible protein 45 alpha (GADD45A) expression is involved in patient prognosis in esophageal cancer. (2013)
  • Author(s): Ishiguro H, Kimura M, Funahashi H, Ogawa R, Shiozaki M, Shibata T, Saito S, Takeyama H.
  • Organizer: DDW 2013
  • Place of Presentation: Orange County Convention Center(Orlando, FL, USA)
  • Year and Date: 20130518-20130521
• [Presentation] Aktの基質であるGirdinは癌細胞の移動に関与しており、食道扁平上皮癌の予後因子である (2013)
  • Author(s): 柴田孝弥、松尾洋一、齋藤慎一郎、佐川弘之、社本智也、長﨑高也、廣川高久、塩﨑みどり、小川了、安藤拓也、高橋広城、若杉健弘、石黒秀行、舟橋整、竹山廣光、坪井謙
  • Organizer: 第113回日本外科学会定期学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場(福岡県)
  • Year and Date: 20130411-13