ヌクレオフォスミン（ＮＰＭ）の解析による肝細胞癌発癌機構及びその治療法の解明

2011 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23591998
• Research Institution: St. Marianna University School of Medicine
• Principal Investigator: 榎本 武治 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (70350626)
• Project Period (FY): 2011-04-28 – 2014-03-31
• Keywords: 国際情報交流

Research Abstract

1．癌細胞由来の培養細胞株においてNPMを強制的に発現抑制下に，HBxの局在について観察する．2．変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する．　3．in vivoにて肝癌発癌マウスを用いたNPMの強制発現抑制下においてHBｘの機能解析を行う．特に平成23年度においては，１．癌細胞由来の培養細胞株においてNPMを強制的に発現抑制下に，HBxの局在について観察する．（滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，Custom Select siRNA Synthesis (Ambion)，各種抗体，共焦点レーザースキャン顕微鏡(LCM510)）２．Crm1複合体に対して特異的に陰性の作用を示すleptomicin Bの投与下に，NPMとHBxの関連を見るため，in vitroで共発現させたこの二つの蛋白質を検討する．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム）サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽Western用セミドライトランスファー，各種抗体）NPMの発現抑制を行うにあたり，条件設定を調整している段階である．次の実験にはこの実験結果が必要であり，現在も調整を続けている．

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

NPMの発現抑制を行うにあたり，条件設定を調整している段階である．次の研究にはこの実験結果の解析が必要であり，現在も早急に調整を続けている．

Strategy for Future Research Activity

平成24年度として変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する．NPM及び上記した点変異型NPMを用いてHBxペプタイドとミックスした上で，In vitro translation kitにて解析を行う．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム））の研究を行う予定である．

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

平成23年度の研究を早期に終了させて，平成24年度に予定している研究を開始したいと考えております．変異型NPMをコントロールすることに肝癌標的治療の可能性があると考え，HBxペプタイドを作成しNPMにおける機能抑制を検討する．NPM及び上記した点変異型NPMを用いてHBxペプタイドとミックスした上で，In vitro translation kitにて解析を行う．（サーマルサイクラー，大腸菌用回転式振盪培養装置，アガロース用電気泳動槽，DNAオートシークエンサー，滅菌キャビネット，ヒト細胞用CO2インキュベーター，ローテーター，PAGE用電気泳動槽，In vitro translation kit（アマシャム））を行うために研究費を使用する予定である．