2011 Fiscal Year Research-status Report
呼吸器悪性腫瘍における自家がん特異的免疫応答を利用した新規腫瘍抗原の同定
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23592080
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| Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
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Principal Investigator |
竹之山 光広 産業医科大学, 医学部, 非常勤講師 (10309966)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
花桐 武志 産業医科大学, 医学部, 准教授 (30299614)
浦本 秀隆 産業医科大学, 医学部, 講師 (90389445)
重松 義紀 産業医科大学, 医学部, 助教 (10546469)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | CTL / 呼吸器悪性腫瘍 / 腫瘍抗原 / 特異的免疫応答 |
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| Research Abstract |
本研究では呼吸器悪性腫瘍患者の自家がん特異的免疫応答を利用した新規腫瘍抗原の同定・解析を行うことにより、新たな診断、治療の標的となる分子の探索を行う。特に自家がん特異的免疫応答を利用するため、実際に癌患者生体内で生じている生体防御機構の解明にもつながる。平成23年度は研究計画1)-3)に対して以下の結果を得た。1) 新たな肺大細胞癌の自己リンパ球-自己腫瘍細胞システムを用いて、リンパ球-腫瘍細胞混合培養を繰り返し、自家がん特異的細胞障害性T細胞のlineを誘導した。このbulk CTLから限界希釈法で5個のCTL cloneを得た。増殖の良いClone 1を用いて、抗腫瘍活性を検討したところ、自家肺癌細胞に特異的に細胞障害性を示し、また他家の肺腺癌、肺扁平上皮癌を認識し、これらの活性は抗HLA-A24抗体で阻害された。Clone 1のTCR , を解析し、単一のT細胞クローンであることを確認した。2) Clone 1を用いて自家腫瘍細胞株から作成したcDNA libraryを用いてcDNA発現クローニングを行ったところ、陽性反応を示すcDNA cloneを単離し、1600bpであった。CTL cloneは本cDNA cloneとHLA-A24 cDNAの両者を293 EBNA細胞にtransfectionしたときのみ、CTL cloneの反応が得られた。3) 肺腺癌からわれわれが同定した癌精巣抗原である、KK-LC1の新規エピトープの探索のために、日本人に頻度の高いHLA-A2, A24にbinding scoreの高いHLA-A2ペプチドとHLA-A24ペプチドを、同患者の自己の末梢血単核球から誘導した樹状細胞にpulseし、凍結保存しておいたリンパ節リンパ球をresponderとして、共培養を繰り返しbulk CTLの誘導を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新たな自家がん特異的CTLクローンの樹立、およびcDNA発現クローニング法で陽性のcDNA cloneが単離までが進んでいるため。
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| Strategy for Future Research Activity |
1）自家がん特異的CTL cloneの認識する腫瘍抗原の同定および機能解析2）既知腫瘍抗原の自家がん特異的免疫応答を利用した新規抗原ペプチドの同定3）浸潤B細胞由来の腫瘍特異的lgGの認識する抗原の探索および解析
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
CTLの誘導・培養、sequence解析、エピトープペプチド同定などに必要な、ﾃﾞｨｽﾎﾟ製品試薬・抗体、RI、動物の購入費、成果発表に使用する。
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