アンジオテンシン受容体制御による虚血性脳損傷抑制のメカニズムに関する研究

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23592083
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 柳澤 俊晴 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20311574)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 菅原 卓 秋田大学, 医学部, 講師 (80241660)
• Keywords: アンジオテンシン受容体 / 脳虚血 / 神経細胞死 / アポトーシス

Research Abstract

１．AT1Rの阻害が海馬CA1領域の神経細胞死を抑制するかどうか．
ラットにAT1R阻害剤（ARB）であるcandesartan(0.1, 1, 10 mg/kg/day)またはvehicleを経口投与し，前述のSmith法により全脳虚血(5分間，31-35 mmHg)を行った．虚血後もcandesartanまたはvehicleの投与継続し，虚血後5日に経心的に潅流固定し，海馬CA1領域の生存神経細胞を評価した．Vehicle群では殆どの神経細胞が細胞質の変形や好酸性変化，核の濃縮像を起こして死滅し，生存する細胞はわずかに5％以下であったが，candesartan 1 mg/kg/day投与群では生存細胞数は30％と増加した．
２．AT1R阻害薬投与群と非投与群で酸化ストレスの発生に差はあるか．
同様の実験系を用いてhydroethidine法により酸化ストレスの発生を観察した．AT1Rを阻害したグループでは虚血に対して脆弱な海馬CA１領域の神経細胞における虚血後酸化ストレス（superoxide）の発生が抑制されていた．
３．AT1R阻害剤投与群でアポトーシス経路のどのレベルで阻害されているか．
分子生物学的手法（Western blot，細胞分画法，免疫染色）により検討を行い、投与群ではcytochrome cのミトコンドリア外漏出が多い傾向にあったが、統計学的優位差は認められなかった。今後は動物数を増やしてさらなる検討を要する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

AT1R阻害剤投与による虚血性神経細胞死の抑制が確かめられた。分子生物学的検討が進行中である。

Strategy for Future Research Activity

動物数を増やし、分子生物学的検討を継続する。平成24年度には実験用試薬の使用量が予想より少なかったため、研究費に残額が生じ、次年度使用額が発生した。平成25年度は平成24年度の残額もあわせて研究を推進する予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

計画通り、動物購入飼育費、抗体など薬品費、謝金などに使用する。平成24年度に生じた残額は試薬などの購入費として使用する予定である。