骨肉腫に対する新規合成プラチナ錯体にカフェインを併用した化学療法の基礎的研究

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23592180
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 山本 憲男 金沢大学, 医薬保健学総合研究科, 特任教授 (90332668)
• Project Period (FY): 2011-04-28 – 2015-03-31
• Keywords: 新規プラチナ製剤

Outline of Annual Research Achievements

骨への親和性に優れ，骨粗鬆症治療薬として用いられる「ビスホスホネート」をその化学構造式に含む3Ptと，プロテアソーム阻害作用を有する1Ptを用いました．通常骨肉腫細胞株，シスプラチン耐性骨肉腫細胞株を用いin vitroでの腫瘍抑制効果についてWST assayを用い評価し，カフェイン添加による効果増強を評価．アポトーシスの誘導はDNA ladder検出，フローサイトメトリーにて評価行いました．DNAとの相互作用についてはHistonH2AXのリン酸化を評価しました．In vivoではヌードマウスの脛骨に通常骨肉腫細胞株を移植したモデルマウスを用い抗腫瘍効果の評価を行いました．各骨肉腫細胞株において濃度依存性に腫瘍抑制効果が観察され、3Ptではシスプラチンを上回る抗腫瘍効果が得られました．カフェイン添加にて抗腫瘍効果は増強．薬剤作用後にはいずれもDNA ladder が検出され，FCMでは濃度依存性にアポトーシスを生じていることが明らかとなりました．シスプラチン耐性骨肉腫細胞株に対しても新規Pt製剤は通常株と同様に抗腫瘍効果を示しました．また各新規Pt製剤を作用させることでH2AXのリン酸化が観察されました．骨肉腫モデルマウスに対して1Ptはシスプラチンと同程度，3Ptはこれを上回る腫瘍抑制効果が得られました．我々の開発した新規Pt 製剤はin vitro において強い抗腫瘍効果を示し，シスプラチン耐性株に対しても交叉耐性を示しませんでした．H2AXリン酸化が証明され、シスプラチンと同様のDNA double strand brakeがその作用機序の一端であることが確認できました．3Ptはシスプラチンを上回る強い抗腫瘍効果を示しました．これは骨組織への選択的デリバリーに優れていることが寄与していると考えられました．