2013 Fiscal Year Annual Research Report
ダイオキシン類介在性アンドロゲン受容体分解による治療抵抗性前立腺癌の治療法開発
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23592321
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
丸山 覚 北海道大学, 大学病院, 助教 (80507591)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
篠原 信雄 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90250422)
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| Keywords | 前立腺癌 / ダイオキシン受容体 / 芳香族炭化水素受容体 / アンドロゲン受容体 / Indirubin |
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| Research Abstract |
アンドロゲン受容体(AR)およびダイオキシン受容体(AhR)を発現している前立腺癌細胞株 (LNCaP) にMMTV-Luc（AR結合配列を含むプロモーター領域をもつレポーターベクター）を発現させ、ルシフェラーゼアッセイをおこなった。各条件の細胞株のARおよびAhRの発現量(mRNA、タンパク)をそれぞれ定量的Real-time PCR法およびウエスタンブロット法で確認した。以上を、同様にアンドロゲンおよび各種ダイオキシン類（Indirubin, 3MC)の有無、また添加量を変えて検討を行った。結果としてダイオキシン類を投与した場合、用量依存的にアンドロゲン受容体の転写活性が低下することを確認した。これはプロテアソーム阻害剤により抑制されたことよりダイオキシン類のアンドロゲン受容体分解が関与していることが示唆された。
ARおよびAhR発現している前立腺癌細胞株 (LNCaP) を培養し、細胞数計測とMTTアッセイをおこなった。結果としてアンドロゲンの有無にかかわらず、ダイオキシン類添加により、用量依存的にホルモン依存性前立腺癌細胞の増殖が抑制された。
上記ダイオキシン類を投与量を変えてマウスに経口および経腹膜投与をおこない連日観察を施行し毒性の確認、致死量を検討した。
パラフィン固定した前立腺手術組織検体でAhR抗体を用いて免疫組織染色を行いダイオキシン受容体のタンパク質レベルでの発現量をみる準備をした。前立腺癌の異型度や予後などの臨床的パラメーター（臨床病期、PSA値、組織分化度(グリーソンスコア)、予後(PSA再発)）との相関の有無を検討した。
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