腎癌ＶＨＬ遺伝子異常解析によるＨＩＦ蛋白の発現予測と分子標的薬の効果予測法の開発

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23592334
• Research Institution: Kochi University
• Principal Investigator: 執印 太郎 高知大学, 教育研究部医療学系, 教授 (70128601)
• Keywords: 腎細胞癌 / von Hippel-Lindau病 / ES細胞 / HIF1a / HIF2a

Research Abstract

我々はVHL遺伝子異常が解析され、予後が確定している約300例の淡明細胞型腎癌検体を保存している。本研究で予後の確定した腎癌から典型的なVHL遺伝子変異を選び、VHLをノックアウトしたマウスES細胞内に変異VHL遺伝子を導入し、VBC複合体の形成をFLET蛍光解析で検討する。またVBC複合体形成不全で起こるUviquitin Ligase活性をVHLノックアウト細胞内でHIF1a・HIF2a蛋白発現として定量的に解析する。同時に腎癌のHIF1a・HIF2a発現解析を行い、実際の癌検体との間で検証を図ることを目的とする。これにより最終的にはVHL遺伝子異常で判断できる分子標的薬治療の治療効果予測法を確立する。
本年の研究実績は、VHLノックアウトマウス由来ES細胞系の変異VHL遺伝子、蛍光色素付きHIF1a・HIF2a遺伝子を導入して発現の定量解析系を確立するためにVHLノックアウトマウス由来のVHL遺伝子全欠損のES細胞を確立した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

予想に反してかなり困難であったが、von Hippel-Lindau（VHL）遺伝子を双方とも欠損したES細胞を樹立した。

Strategy for Future Research Activity

予定通り、変異型VHL遺伝子をES細胞に組み込んで細胞内でのHIFの発現を試みる。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

変異型VHL遺伝子をES細胞に組み込んで細胞内でのHIFの発現を解析するために使用する。