上皮間葉系移行を標的とした脈絡膜悪性腫瘍の浸潤・転移抑制治療の開発

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23592583
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 田中 才一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60316106)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 雑賀 司珠也 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40254544) ; 岡田 由香 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50264891)
• Project Period (FY): 2011-04-28 – 2016-03-31
• Keywords: メラノーマ / 上皮間葉系移行

Outline of Annual Research Achievements

今回の追加の悪性黒色腫のB16悪性黒色腫細胞株をコンフルエントに培養し、以下の細胞の検討を行った。B16悪性黒色腫細胞株は網目状に増殖した。トランスフォーミング成長因子ベータ（1 ng/ml）添加の無い状態では有意なリン酸化Smad2とリン酸化p38は検出されなかった。トランスフォーミング成長因子ベータ（1 ng/ml）添加後、３０分，６０分、１２０分でのシグナル伝達の活性化を検討した。Smad2とp38のリン酸化が促進されたが、JNKとErkのリン酸化の亢進は観察されなかった。DAB発色免疫組織化学的にリン酸化Smad2とリン酸化p38は，主に細胞質に，一部細胞核に検出された。トランスフォーミング成長因子ベータ（1 ng/ml）に４８時間暴露したB16悪性黒色腫細胞株ではビメンチンとI型コラーゲンの発現が増強したが、アルファ平滑筋アクチンの発現誘導は観察されなかった。ファイブロネクチンの発現亢進は観察されなかった。上皮細胞系では、トランスフォーミング成長因子ベータが細胞増殖を抑制したり、細胞死を誘導する場合が有る事が報告されているが、B16悪性黒色腫細胞株ではトランスフォーミング成長因子ベータ（1 ng/ml）、４８時間暴露においてアポトーシスに落ちいって死滅する事は無かった。B16悪性黒色腫細胞株では、トランスフォーミング成長因子ベータが部分的な上皮―間葉系移行が誘導されると思われたが，筋線維芽細胞の誘導に至る事はないと考えられた。