2011 Fiscal Year Research-status Report
培養口腔粘膜上皮による眼表面再構築と上皮分化制御による視機能再生への展開
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23592614
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
稲富 勉 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00305583)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川崎 諭 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60347458)
丸山 和一 京都府立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (10433244)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | 再生医療 / 角膜上皮 / 口腔粘膜上皮 / 細胞分化 / 新生血管因子 |
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| Research Abstract |
口腔粘膜組織および口腔粘膜上皮を羊膜上に培養して作成した培養上皮シートの細胞特性について比較検討できた。また角膜上に移植した状態での生着上皮の細胞特性を解析した。口腔粘膜上皮および移植後の上皮では角膜と異なり角膜上皮特異的なK12や眼組織に特異的なPAX6遺伝子の発現誘導は観察されなかった。DNAチップによる比較解析では培養口腔粘膜上皮は角膜上皮と口腔粘膜上皮との中間的な遺伝子発現パターンを認めた。口腔粘膜上皮にみられるK3の発現は維持された。また幹細胞特異的なマーカーであるp75陽性細胞がクリプト構造内に存在しており、培養上皮シートの基底細胞にはp75陽性細胞が存在した。細胞臨床的にも５年以上の症例でフルオレセイン染色により眼表面粘膜とは区別される異所性上皮の生着が観察できた。In vivo confocal microscopyでは角膜上皮に類似した非角化重層上皮の再構築が観察されたが、神経再生や細胞の角膜化へのtransformationは認められなかった。また口腔粘膜上皮を眼表面に移植するとすべての症例で周辺部からの血管新生が誘導された、術後６か月程度まで血管伸展が観察される。基底膜でのTSP1の発現が低く、角膜と比較し、血管新生抑制因子の発現低下が血管新生に関与していることが示唆された。また抗VEGF抗体であるAvastinは口腔粘膜上皮の増殖を軽度抑制したが、in vivoでの投与にて血管新生の抑制が可能であった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
培養口腔粘膜におけるp75を主体とした増殖能の解析は実施できているが上皮増殖能との関連性やシート内での含有率および臨床成績との対比は検討できていない。また新生血管との関連性はTSP1およびVEGFとの関連性は検討できてきたが他の予定してた他の関連因子との検討をすすめる。ドライアイストレスや角化関連因子の発現検討は未解決でありH24年度での研究課題とする。
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| Strategy for Future Research Activity |
培養口腔粘膜上皮の増殖能と組織再構築の解析検討をすすめる。特にp75陽性細胞の生着後の局在、臨床的な長期生着とそれに影響する因子について検討する。血管新生に関しては眼表面移植後の推移を検討し、長期的な予後とそれに影響する因子の解析をすすめる。また角膜上皮化に発現しているCytotoxic T-lymphocyte alpha-2(CTLA-2alpha)とThrombospondin-1(TSP-1)の血管新生抑制に対する関連性を検索し、移植後の血管新生制御の可能性について検索する。口腔粘膜上皮の粘膜特性の維持について検討し、乾燥ストレスに対する角化誘導関連因子の発現やケラチン発現パターンの変化について検討する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
本研究に関しての形態学的な解析や培養機器、分子生物学的な実験に必要となる備品はすでに設置されているため特別な支出は予定していない。細胞もしくは組織特性の解析を免疫学的手法と遺伝子発現解析を主体に行う。各種抗体の購入、遺伝子解析のためのプローブおよびプライマー作成と各種酵素や薬品の購入経費、培養上皮シート作成と培養方法に関連する消耗品の購入を予定する。日本臨床眼科学会、日本眼科学会、角膜学会の国内外の学会参加を予定する。
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Research Products
(5 results)
