2012 Fiscal Year Research-status Report
歯髄・根尖歯周組織の慢性炎症抑制と硬組織形成を同時誘導する再生療法の開発
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23592803
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| Research Institution | Kyushu Dental College |
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Principal Investigator |
北村 知昭 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (50265005)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西原 達次 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (80192251)
鷲尾 絢子 九州歯科大学, 歯学部, 助教 (10582786)
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| Keywords | 歯髄 / 骨 / 根尖歯周組織 / 再生医療 / 炎症制御 / 慢性炎症 |
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| Research Abstract |
本研究は，抗炎症能あるいは組織誘導能が知られている生体分子，多血小板血漿（Platelet Rich Plasma; PRP）が各種細胞に与える影響を検討し，生体分子，PRP応用による断髄部，根尖病変部再生療法の実用化を目的としている．
これまでに私達は，Fibroblast Growth Factor-2（FGF-2）徐放による象牙質欠損部への新生象牙質形成誘導や象牙芽細胞様細胞株の樹立等，歯髄再生に必須の研究成果を挙げてきた．
本年度は，私達が開発している新規セメントの象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞，神経細胞への影響，ステロイドコアクチベーターMTI-IIの骨芽細胞様細胞，象牙芽細胞様細胞への影響，PRP，アメロブラスチンの上皮細胞への影響について検討した．
その結果，BMP-2は象牙芽細胞様細胞の分化に影響を与えることを明らかにした（Kitamura et al., Polymers, 2011; Washio et al., Int J Dent, 2012; Jimi et al., Int J Dent, 2012）．また，新しく開発したセメントは象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞に親和性を有するとともに神経細胞の突起伸長を誘導すること，MTI-IIは骨芽細胞様細胞，象牙芽細胞様細胞の炎症応答を抑制すること，PRPが象牙芽細胞様細胞の炎症応答遺伝子の発現を誘導すること，さらにアメロブラスチンは上皮増殖を抑制することを明らかにした．今後はそれぞれの誘導・抑制における機能解析を実施する予定である．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在実施しているのは，新規セメントの象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞，神経細胞への影響，ステロイドコアクチベーターMTI-IIの骨芽細胞様細胞，象牙芽細胞様細胞への影響，多血小板血漿（Platelet Rich Plasma; PRP），Fibroblast Growth Factor-2（FGF-2）の象牙芽細胞様細胞への影響，ならびにアメロブラスチンの上皮細胞への影響についての検討である．
平成24年度は，新規セメントについては象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞への親和性を有するとともに神経細胞の突起伸長を誘導すること， MTI-IIについては骨外細胞様細胞，象牙芽細胞様細胞における遺伝子発現レベルでの炎症抑制が示されたこと，FGF-2の象牙芽細胞様細胞への影響についてはFGF-2が象牙芽細胞様細胞の突起伸長を誘導すること，PRPについては抗炎症応答，分化誘導能が遺伝子レベルで確認されたこと，さらにアメロブラスチンについては上皮細胞の増殖を抑制することが明らかとなった．現時点で論文公表に至る成果はないが，順次学会発表をしており，当初に予定していた進行度合はおおむね達成しているため，自己点検による評価としてはおおむね進展していると言える．
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度においては，平成23年度に本研究費で計上した備品を用い，平成24年度の成果をもとに，次年度研究費より細胞培養等に必要な消耗品費を拠出して，さらに研究を進める．
具体的な平成25年度以降の研究の推進方策としては以下の通りである．私達が開発している新規セメントについては，象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞への生体親和性・炎症応答等における機能解析を引き続き行うとともに神経細胞突起伸長誘導のメカニズムを解析する予定である．ステロイドコアクチベーターMTI-IIについては，骨芽細胞様細胞，象牙芽細胞様細胞での炎症抑制過程における機能解析とMTI-IIタンパク質投与による影響を検討する予定である．また，多血小板血漿（Platelet Rich Plasma; PRP）については，さらに炎症応答メカニズムを解析するとともに石灰化能への影響を検討していく．さらにアメロブラスチンについてはフローサイトメトリー等を用いた上皮細胞周期への影響，およびアポトーシス誘導への影響を検討する予定である．
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度においては，平成23年度に本研究費で計上した備品を用い，平成24年度の成果をもとに，次年度研究費より細胞培養等に必要な消耗品費を拠出する．
具体的な平成25年度研究費の使用計画としては以下の通りである．どの研究計画においても必要な培養用ディッシュ等購入に使用する．新規セメントの象牙芽細胞様細胞，骨芽細胞様細胞への生体親和性・炎症応答，および神経細胞突起伸長メカニズム等における機能解析については，炎症誘導因子TNF-α等を購入する．ステロイドコアクチベーターMTI-IIの骨芽細胞様細胞での炎症抑制については炎症性メディエーター発現を解析するために必要なPCR，ウエスタンブロッティング用消耗品を購入する．Fibroblast Growth Factor-2（FGF-2）の象牙芽細胞様細胞の突起伸長誘導については，FGF-2シグナル伝達経路上で機能するタンパク質発現の解析を行
うため，ウエスタンブロッティング等に用いる消耗品を購入する．また，多血小板血漿（Platelet Rich Plasma; PRP）については，PRPによる抗炎症応答タンパク質発現の解析をするための消耗品を購入する．アメロブラスチンについてはフローサイトメトリーおよびアポトーシス検出に必要な消耗品を購入する予定である．
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