2013 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
23592991
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Research Institution | Okayama University |
Principal Investigator |
松村 達志 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (70432648)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田畑 純 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (20243248)
平田 あずみ 大阪医科大学, 医学部, 助教 (40263587)
山近 英樹 岡山大学, 大学病院, 講師 (10294422)
森谷 徳文 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (60467751)
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Keywords | 歯根形成 / 再生医学 |
Research Abstract |
歯の発生研究は歯冠形成期の上皮・間葉相互作用を中心に進められてきた。一方、歯根形成期は、再生歯根と既存の歯科治療の組み合わせで機能回復が可能な事から注目されているものの、in vitro実験系が十分に整備されていない事から得られる知見も限られていた。申請者らは上皮と間葉の細胞を個々に調整、制御できる新しい共培養法=TDL培養を開発し、この系によりエナメル芽細胞の典型的な形態と歯胚組織の再構築を可能とした。そこで、TDL培養法を歯根形成期のin vitro実験系に応用して、新たな手法の導入とメカニズム解明に切り込むことを着想した。初年度は、免疫組織学的手法によりパールカンが歯髄細胞のマーカーとなりうる事を明らかにした。TDL培養で必要な歯胚間葉細胞の採取は確立しているため、次年度はラット切歯から歯根上皮・マラッセの上皮遺残の取り出しを試みた。通常の外科的処置では歯根上皮の採取は困難であったため、コラゲナーゼ酵素処理を加えた歯根上皮の取り出しを試みてシート上で培養した。その結果、歯根上皮の割合は非常に少なく、多量のシャーピー繊維、繊維芽細胞、血管網等を認めた。通常の方法ではTDL培養に用いる歯根上皮の採取が困難であったため、最終年度はラット切歯舌側の形態観察を行ったところ、セメント質があまり形成されておらず、ヘルトビッヒ上皮鞘(HERS)中間付近の形態が不明瞭で断裂像、集塊像を認めなかった。この結果より、常生歯は常に萌出し続けるため、セメント質が不要であり、HERSは断裂しないまたは断裂しても上皮断片は残らない可能性が示唆された。
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