2012 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトＥＳ細胞の神経分化を制御するノンコーディングＲＮＡの解析
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23650194
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
岡田 洋平 慶應義塾大学, 医学部, 特任講師 (30383714)
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| Keywords | ノンコーディングRAN / ヒトES細胞 / 神経幹細胞 / 神経分化 |
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| Research Abstract |
本研究では、ヒトES細胞の神経分化に伴い発現が上昇するnon-coding RNAを同定し、その神経分化における役割を明らかにする。昨年度までに、ゲノムタイリングアレイを用いて、ヒトES細胞から神経幹細胞へと分化誘導する過程において、発現が上昇するnon-coding RNAを57個同定した。さらに、神経幹細胞のマーカーであるSOX1を発現する神経系前駆細胞を約一週間で誘導することのできる、迅速単層神経分化誘導法を開発した。
今年度は、SOX1のBAC(Bacterial Artificial Chromosome)を用いて、ヒトES細胞の神経分化を、蛍光タンパクと発光タンパクの両方で定量的に可視化できる(ffLuc)、レポーターヒトES細胞を作成した。この細胞は、ニューロスフェア法においても、迅速単層神経分化誘導法においても、神経分化と共にffLucの発現が速やかに上昇し、簡便に神経分化をモニタリングできることを確認した。
さらに、ヒトES細胞、およびレポーターヒトES細胞に、エレクトロポレーション法により、同定したncRNAに対するsiRNAを導入して、神経分化に与える影響を解析するスクリーニングを行っている。
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[Journal Article] Efficient Derivation of Multipotent Neural Stem/Progenitor Cells from Non-human Primate Embryonic Stem Cells2012
Author(s)
Shimada H, Okada Y, Ibata K, Ebise H, Ota S, Tomioka I, Nomura T, Maeda T, Kohda K, Yuzaki M, Sasaki E, Nakamura M, Okano H
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Journal Title
PLoS One
Volume: 7(11)
Pages: e49469
DOI
Peer Reviewed
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