2011 Fiscal Year Research-status Report
ヒトｉＰＳ細胞を用いた腫瘍抗原受容体認識薬物運搬システムの開発
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23650622
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
江藤 浩之 京都大学, ｉＰＳ細胞研究所, 教授 (50286986)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 癌治療 / 薬物運搬方法 / Tリンパ球 / 血小板 / 巨核球 |
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| Research Abstract |
現在までに、ヒトES細胞、iPS細胞をソースに、凍結可能な巨核球細胞株の誘導に成功した。また、T細胞由来のiPS細胞からの巨核球、および血小板への誘導に関しては確認済みである。作製に成功した巨核球細胞株は、ES細胞、iPS細胞から誘導する造血前駆細胞集団に特定の遺伝子を導入し、特殊な培養条件下に暴露することで、自己複製能を獲得し、in vitroの条件で増殖を繰り返す。一方、本巨核球細胞株は、導入遺伝子の発現off状態および環境の変化に伴って、機能性血小板を放出する事を確認した。計画ではH２３年度は、(1)担癌患者の細胞障害性T細胞由来iPS細胞の樹立、(2) 抗原特異的TCR配列の決定、(3) TCR配列を組み込んだ巨核球特異的発現用ベクター、ウイルスの構築 を計画していた。現在までの検討により、本巨核球細胞株での遺伝子操作がより簡便に行えるためには、遺伝子の発現を薬剤等により自由に制御できる為のベクターシステムの構築が不可欠である事が明らかになった。このべクターの選択および改変が本プログラムの成功には必須であるが、H23年度は遺伝子操作方法およびベクターの構築に時間を要している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
繰り返しになるが、T細胞受容体の発現、ならびにキメラ受容体を血小板においても発現と機能が保持できる事を目指したベクターシステムの構築に時間を要している。血小板放出の巨核球細胞株での遺伝子操作がより簡便に行えるためには、遺伝子の発現を薬剤等により自由に制御できる為のベクターシステムの構築が不可欠であり次年度は遺伝子操作方法およびベクターの構築を早期に完成させる。
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| Strategy for Future Research Activity |
巨核球細胞株、由来血小板に加えて、末梢血血小板を陽性コントロールに使用して、選択的に血小板顆粒に薬剤を取り込む事ができるのか？選択的に薬剤の放出が血小板活性化剤依存的に可能か？の二つの重要な命題の検証を先ず行う。この基礎的なデータを基に、T細胞受容体キメラのベクターデザインを考慮、設計する。iPS細胞からのT細胞や巨核球の作製はできており、目的となるキメラT細胞受容体の発現とその制御系を既存の細胞等（K562, CMKなどの巨核球癌細胞株）で確認した上で、iPS細胞から誘導する巨核球細胞株での制御を試みる。目標は、本巨核球細胞および放出される血小板でのT細胞受容体でありながら、細胞内ドメインに関しては、Ca2+シグナルやProtein Kinase Cの活性化が起きるようなキメラ受容体を発現させることにあり、本システムのバリデーションを早期に行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
分子生物学、生化学関連試薬等の消耗品費と、学会参加のための旅費に使用する。研究遂行の為の新規の機器購入計画はない。
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[Journal Article] Integrin αvβ3 regulates thrombopoietin-mediated maintenance of hematopoietic stem cells2012
Author(s)
Umemoto T, Yamato M, Ishihara J, Shiratsuchi Y, Utsumi M, Morita Y, Tsukui H, Terasawa M, Shibata T, Nishida K, Kobayashi Y, Petrich BG, Nakauchi H, *Eto K, Okano T
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Journal Title
Blood
Volume: 119(1)
Pages: 83-94
Peer Reviewed
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[Journal Article] Heterozygous ITGA2B R995W mutation inducing constitutive activation of the {alpha}IIb{beta}3 receptor affects proplatelet formation and causes congenital macrothrombocytopenia2011
Author(s)
Kunishima S, Kashiwagi H, Otsu M, Takayama N, Eto K, Onodera M, Miyajima Y, Takamatsu Y, Suzumiya J, Matsubara K, Tomiyama Y, Saito H
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Journal Title
Blood
Volume: 117
Pages: 5479-84
Peer Reviewed
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[Presentation] TRANSIENT ACTIVATION OF C-MYC EXPRESSION IS CRITICAL FOR EFFICIENT PLATELET GENERATION FROM HUMAN INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS2011
Author(s)
Takayama N, Nishimura S, Nakamura S, Shimizu T, Ohnishi R, Endo H, Yamaguchi T, Otsu M, Nishimura K, Nakanishi M, Sawaguchi A, Nagai R, Takahashi K, Yamanaka S, Nakauchi H, Eto K
Organizer
XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis (ISTH2011)
Place of Presentation
Kyoto, Japan
Year and Date
July 23-28, 2011
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[Presentation] Nov/CCN3 Enhances Long-Term Repopulating Activity of Mouse Hematopoietic Stem Cells Via Intergin β3 Signaling Collaborating with Thrombopoietin2011
Author(s)
Jun Ishihara, Terumasa Umemoto, Masayuki Yamato, Yoshiko Shiratsuchi, Brian G. Petrich, Hiromitsu Nakauchi, Koji Eto, Toshio Kitamura, and Teruo Okano
Organizer
53rd ASH Annual Meeting and Exposition
Place of Presentation
San Diego, USA
Year and Date
December 10-13, 2011
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