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2012 Fiscal Year Annual Research Report

iPS細胞の樹立効率化のためのへテロオリゴマーを介した癌抑制タンパク質p53阻害

Research Project

Project/Area Number 23651210
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

坂口 和靖  北海道大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (00315053)

Keywords蛋白質 / へテロオリゴマー / 転写活性 / iPS細胞 / フラグメント縮合
Research Abstract

iPS細胞は、様々な組織や臓器の細胞に分化する能力をもち、疾患モデル、再生医療および創薬への応用が強く期待されている。しかしながら、現在iPS細胞の作製時におけるp53-p21経路の活性化により樹立効率が極めて低いことが大きな問題点となっており、樹立効率を改善する方法の開発が必須である。
本研究では、iPS細胞の樹立効率向上のため、対象となる標的細胞において、p53四量体形成ペプチドによる細胞内p53タンパク質とのヘテロ四量体形成を基盤として、p53機能を効率的、かつ一過的に阻害する方法の開発を実施している。
本年度は、より効果的に細胞内p53活性を阻害するため、Effector segmentの検討を実施した。まず、Effector segmentをp53の四量体形成ドメインペプチドのN末端に効果的に付加するため、フラグメント縮合による長鎖p53ペプチド合成法の最適化を実施した。その結果、Effector segment付加p53ペプチド合成法を確立した。
また、p53転写活性阻害の解析のための改良型生細胞アッセイ系を構築した。この系においては、蛍光タンパク質融合p53発現ユニットとp53依存的プロモーターの下流に赤色蛍光タンパク質mCherry発現ユニットを同一のプラスミドに持つため、p53タンパク質量およびp53依存的p21転写活性を同時にかつ定量的に解析することが可能となった。
今後、申請者は開発した阻害手法を基盤として、フラグメント縮合法により多様なペプチドを効率的に作製し、さらなるペプチド配列の精密化および最適化を実施していく。これより得られた最適化p53活性阻害ペプチドは、iPS細胞樹立の過程において実用化されることで、その効率的な作製へと大きく貢献することが期待される。

  • Research Products

    (8 results)

All 2013 2012

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (7 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] Silver nanocrystals formed by oligemeric biomineralization peptide via p53 tetramerization domain2013

    • Author(s)
      T. Sakaguchi
    • Journal Title

      Peptide Science

      Volume: 2012 Pages: 57-58

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 癌抑制タンパク質p53の四量体形成ドメインにおけるアルギニン残基修飾の構造安定性に対する効果2013

    • Author(s)
      J. Wada
    • Organizer
      第13回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      とりぎん文化会館(鳥取県)
    • Year and Date
      20130612-20130614
  • [Presentation] Formation of Palladium Nanosponges by an Oligomerized Biomineralization Peptide through the p53 Tetramerization Domain2012

    • Author(s)
      J.I.B. Janairo
    • Organizer
      第49回ペプチド討論会
    • Place of Presentation
      かごしま県民交流センター (鹿児島県)
    • Year and Date
      20121107-20121109
  • [Presentation] Silver Nanocrystals Formed by Oligemeric Biomineralization Peptide via p53 Tetramerization Domain2012

    • Author(s)
      T. Sakaguchi
    • Organizer
      第49回ペプチド討論会
    • Place of Presentation
      かごしま県民交流センター (鹿児島県)
    • Year and Date
      20121107-20121109
  • [Presentation] Biomineralization and nanoparticle arrangement by Oligomeric Peptides2012

    • Author(s)
      K. Sakaguchi
    • Organizer
      Cambodian Malaysian Chemical Conference 2012
    • Place of Presentation
      Angkor Century Resort and Spa (カンボジア)
    • Year and Date
      20121019-20121021
    • Invited
  • [Presentation] 癌抑制タンパク質p53に対する一過性ペプチド阻害剤の開発2012

    • Author(s)
      J. Wada
    • Organizer
      日本化学会秋季事業-第2回CSJ化学フェスタ2012
    • Place of Presentation
      東京工業大学(東京都目黒区)
    • Year and Date
      20120914-20120917
  • [Presentation] Control of Biomineralization and Nanoparticle Arrangement via Peptide Self-assembly2012

    • Author(s)
      K. Sakaguchi
    • Organizer
      14th Akabori Conference
    • Place of Presentation
      ニセコ町民センター(北海道)
    • Year and Date
      20120910-20120914
    • Invited
  • [Presentation] p53標的遺伝子プロモーターに対する内因性p53依存的転写活性の蛍光解析系2012

    • Author(s)
      T. Higashi
    • Organizer
      第49回日本生化学会北海道支部例会
    • Place of Presentation
      北海道大学(札幌市)
    • Year and Date
      20120720-20120720

URL: 

Published: 2014-07-24  

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