2012 Fiscal Year Research-status Report
フロリゲン直接注入法を活用したカンキツの幼若期短縮方法の開発
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23658031
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| Research Institution | Saga University |
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Principal Investigator |
永野 幸生 佐賀大学, 総合分析実験センター, 准教授 (00263038)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松本 亮司 佐賀大学, 農学部, 教授 (40355409)
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| Keywords | 園芸学 / バイオテクノロジー / 発生・分化 / 蛋白質 / 植物 |
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| Research Abstract |
フロリゲンは花芽形成を誘導する物質である。最近、カラタチを台木として成熟相のウンシュウミカンを穂木として接いだものにロリゲンを直接注入して、花芽形成を誘導できることを見いだした。すなわち、着花しないけれども成熟相にある「栄養的成熟相」の短縮に成功した。しかし、実生樹の開花までの期間の短縮、すなわち、幼若期の短縮には成功していない。そこで、本研究では、ウンシュウミカンに代表されるカンキツを研究材料に、フロリゲン直接注入法の更なる改善を試み、更にフロリゲン直接注入法と他の手法を組み合わせることで、幼若期短縮方法を開発することを目指した。
まず、フロリゲン直接注入法の更なる改善を試みた。その結果、この方法が極めて不安定がわかってきた。昨年度明らかにした品種間差異が顕著であることに加えて、実験を行った年により結果に変動があることがわかってきた。
次に、フロリゲン直接注入法と他の手法を組み合わせについて検討を行った。まず、開花阻害タンパク質であるTFL1の低分子阻害剤の探索を行った。具体的には、コンピュータシミュレーションにより、TFL1の機能的に重要なポケットに結合する低分子化合物候補を探索した。これは昨年度も行い7種類の候補化合物を見つけているが、今年度は大規模に計算を行い、約20種類の候補化合物を見いだした。併行して行った化合物アレイスクリーニングによりTFL1と結合する化合物1種類を見いだした。
次に、これら物質のいくつかについて開花への効果を調べた。化合物アレイスクリーニングにより見つかった1化合物については、植物を枯死させた。また、コンピュータによるシミュレーションで見つかった1化合物については、効果が認められなかった。
また、これら研究においては盛んに組換えタンパク質を使うけれども、そのために有効な研究手法を開発し、国際誌に論文として発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
まず、フロリゲン直接注入法の更なる改善を行った。しかし、上述のように、この技術が不安定であることが徐々にわかってきた。そのため、特に農業現場で使う技術としては、多くの改善が必要であると考えられる。
次に、フロリゲン直接注入法と他の手法を組み合わせについて検討を行った。植物がFTタンパク質の活性を阻害する物質を分泌しているため、開花誘導の効率が悪い可能性がある。TFL1（Terminal Flower 1）というタンパク質がFTタンパク質と拮抗する作用をもつことが知られているが、これがこの阻害物質の最有力候補である。そこで、阻害物質の候補を大規模にスクリーニングした。その結果、今年度は、多数の低分子化合物候補を見いだすことができた。上述のように、これら化合物のうち、安価に入手できるという理由で2種類の物質について開花への効果を調査したが、これらについては効果は認められなかった。今後、残りの化合物の作用に期待が持たれる。
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| Strategy for Future Research Activity |
フロリゲン直接注入法の更なる改善についても、引き続き検討を行うが、上述のように、この方法が極めて不安定がわかってきたので、前年度に、大きな進展があった「フロリゲン直接注入法と他の手法を組み合わせ」について検討を行う。場合によっては、フロリゲン直接注入法と組み合わせなくても、現在、開発中の方法は有効かもしれないので、その可能性についても検討する。
上述のように、化合物アレイスクリーニングにより見つかった1化合物については、植物を枯死させることがわかったけれども、コンピュータによるシミュレーションで見つかった約20種類の化合物については、まだ十分に効果を検討できていない。それは、これら化合物が高価であるためである。そのため、植物への効果を試す物質をある程度絞り込む必要がある。字数の関係で「研究実績の概要」に記すことができなかったけれども、我々はTFL1と結合する蛋白質をいくつか見つけている。そこで、まず、TFL1結合蛋白質とTFL1の結合を、これら候補化合物が阻害するかどうかを調べる。次に、ここで効果が見られた化合物について、多量に購入し、植物への効果を調べる予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
前年度に、大きな進展があった「フロリゲン直接注入法と他の手法を組み合わせ」について研究に研究費の多くを使用する。具体的には、コンピュータによりシミュレーションで見つかった低分子化合物の購入に研究費の多くを投入したい。その他、組み換え蛋白質の生産など日常的に必要な研究に研究費を使用する。
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