2012 Fiscal Year Annual Research Report
鞘翅目昆虫キクイムシにおける半数ー倍数性による性決定機構の解明
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23658046
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
新美 輝幸 名古屋大学, 生命農学研究科, 助教 (00293712)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梶村 恒 名古屋大学, 生命農学研究科, 准教授 (10283425)
佐原 健 岩手大学, 農学部, 教授 (30241368)
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| Keywords | 性決定 / 半数ー倍数性 / キクイムシ |
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| Research Abstract |
本研究では、キクイムシの性決定に関与する候補となる遺伝子群を種々の方法を駆使してクローニングする。これら遺伝子ついてRNAi法を用いた遺伝子機能解析を行うことにより、半数-倍数性に基づく性決定におけるこれら遺伝子の役割を解明することを目的とする。
今年度は、前年度部分配列をクローニングした性的二型形成を司る性決定遺伝子 doublesex（dsx ）についてcDNAの構造上の特徴からtransformer（tra）とtarnsformer-2（tra-2）によるdsx遺伝子の選択的スプライシングによる調節メカニズムに関するヒントを得るため、Xyleborini族のキクイムシであるファイルキクイムシ（ Xyleborus pheili ）のdsxの全長cDNAのクローニングを試みた。この結果、大変興味深いことにファイルキクイムシのdsx cDNAには雌雄共通領域においても複数のスプライシングバリアントが存在することが判明した。さらに、ファイルキクイムシの雌では、雌型dsx cDNAから少なくとも3種類の異なるタンパク質が発現する可能性が示された。以上の結果より、ファイルキクイムシのdsx遺伝子は、これまでに報告されている昆虫種のdsx遺伝子にはない特徴を備えていることが判明した。すなわち、TraとTra-2タンパク質による選択的スプライシングの調節メカニズムの点においてこれまでの報告にない興味深いメカニズムが存在する可能性が示唆された。
ファイルキクイムシについて、幼虫体へ二本鎖RNAをインジェクションするlarval RNAi法を試みた。しかしながら、ファイルキクイムシの幼虫はインジェクションによるダメージによる影響が大きく、羽化する個体は皆無であった。何度も試行錯誤を行ってインジェクション法を改良することにより、羽化率が100％近く得られる条件を見出すことに成功した。
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