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2011 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトES細胞を用いたヒト胎生期造血の解析

Research Project

Project/Area Number 23659533
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

辻 浩一郎  東京大学, 医科学研究所, 准教授 (50179991)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大津 真  東京大学, 医科学研究所, 特任准教授 (30361330)
Project Period (FY) 2011-04-28 – 2012-03-31
KeywordsヒトES細胞 / ヒト胎生期造血 / 間葉系幹細胞 / 造血前駆細胞
Research Abstract

我々は、従来の異種動物であるマウスのストローマ細胞との共培養によるヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導系では、ヒト胎生期造血を正確に再現していないと考えられる。一方、ヒト成人骨髄ストローマ細胞との共培養ではヒトES細胞の造血/血液細胞への困難であることから、ヒト胎生期造血を正しく再現するヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導系の構築が必要と考えられた。そこで我々は、ヒトES細胞自身からストローマ細胞を分化誘導し、このストローマ細胞との共培養によりヒトES細胞を造血/血液細胞へ分化誘導することを試みた。
まず、ヒトES細胞をゼラチン・コート・ディッシュに播種し、ヒト血清あるいは多血小板血漿を含む培養液で培養し、3~4日毎のメディウム交換と2~3週毎の継代を行った。その結果、培養開始後6~8週でストローマ細胞が樹立された。樹立されたストローマ細胞は、CD105+、CD166+、SSEA-4dull、CD45-、CD34-、CD31-で、軟骨細胞、骨芽細胞、脂肪細胞に分化可能な間葉系幹細胞であることが確認された。
そこで、ヒトES細胞をこの自己ヒトES細胞由来間葉系幹細胞と、種々のサイトカイン存在下で2週間共培養したところ、種々の造血前駆細胞が出現した。これらの造血前駆細胞を血液細胞培養コロニー法で培養したところ、赤血球、好中球など様々な血液細胞が出現した。
今回我々が開発した自己ヒトES細胞由来間葉系幹細胞との共培養によるヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導法は、ヒト胎生期造血をよく再現しており、ヒト胎生期造血の解析に有用と考えられた。

  • Research Products

    (29 results)

All 2012 2011 Other

All Journal Article (10 results) (of which Peer Reviewed: 10 results) Presentation (12 results) Book (4 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (2 results) (of which Overseas: 2 results)

  • [Journal Article] In vivo imaging visualizes discoid platelet aggregations without endothelium disruption and implicates contribution of inflammatory cytokine and integrin signaling2012

    • Author(s)
      Nishimura, S., Manabe, I., Nagasaki, M., et al.
    • Journal Title

      Blood

      Volume: 119 Pages: e45-56

    • DOI

      DOI:10.1182/blood-2011-09-381400

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Unrelated cord blood transplantation after myeloablative conditioning regimen in adolescent and young adult patients with hematologic malignancies : a single institute analysis2012

    • Author(s)
      Ebihara, Y., et al
    • Journal Title

      Leuk.Res.

      Volume: 36 Pages: 128-131

    • DOI

      10.1016/j.leukres.2011.09.016

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The antigen CD34 : A molecule displaying an implication in regenerative signal in hematopoietic stem cell2012

    • Author(s)
      Singh VK, et al
    • Journal Title

      STEM CELLS Trans.Med.

      Volume: (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Frequent pathway mutations of splicing machinery in myelodysplasia2011

    • Author(s)
      Yoshida, K., Sanada, M., Shiraishi, Y., et al.
    • Journal Title

      Nature

      Volume: 478 Pages: 64-69

    • DOI

      DOI:10.1038/nature10496

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Minimum requirement of donor cells to reduce the glycolipid storage following bone marrow transplantation in a murine model of Fabry disease2011

    • Author(s)
      Yokoi, T., Kobayashi, H., Shimada, Y., et al.
    • Journal Title

      J Gene Med

      Volume: 13 Pages: 262-268

    • DOI

      DOI:10.1002/jgm.1566

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Intracellular estrogen receptor-binding fragment-associated antigen 9 exerts in vivo tumor-promoting effects via its coiled-coil region2011

    • Author(s)
      Maeyama, Y., Otsu, M., Kubo, S.
    • Journal Title

      Int J Oncol

      Volume: 39 Pages: 41-49

    • DOI

      DOI:10.3892/ijo.2011.1026

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Heterozygous ITGA2B R995W mutation inducing constitutive activation of the alphaIIbbeta3 receptor affects proplatelet formation and causes congenital macrothrombocytopenia2011

    • Author(s)
      Kunishima, S., Kashiwagi, H., Otsu, M., et al.
    • Journal Title

      Blood

      Volume: 117 Pages: 5479-5484

    • DOI

      DOI:10.1182/blood-2010-12-323691

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Growth promotion of genetically modified hematopoietic progenitors using an antibody/c-Mpl chimera2011

    • Author(s)
      Kawahara, M., Chen, J., Sogo, T., et al.
    • Journal Title

      Cytokine

      Volume: 55 Pages: 402-408

    • DOI

      DOI:10.1016/j.cyto.2011.05.024

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Reduced dose chemotherapy for acute promyelocytic leukemia with adult Down syndrome2011

    • Author(s)
      Tsuda, M., et al
    • Journal Title

      Br.J.Haematol.

      Volume: 155 Pages: 130-132

    • DOI

      10.1128/CVI.00428-10

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sero-prevalence of pandemic (H1N1) 2009 influenza A virus among schoolchildren and their parents in Tokyo, Japan2011

    • Author(s)
      Iwatsuki-Horimoto, K., et al
    • Journal Title

      Clin.Vaccine Immunol.

      Volume: 18 Pages: 860-866

    • DOI

      10.1128/CVI.00428-10

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 誰でもわかる造血幹細胞の基礎知識2012

    • Author(s)
      辻浩一郎
    • Organizer
      第34回日本造血細胞移植学会
    • Place of Presentation
      大阪:大阪国際会議場
    • Year and Date
      20120224-25
  • [Presentation] 成人臍帯血移植患者におけるボリコナゾールとシクロスポリン併用療法の安全性評価2012

    • Author(s)
      前浩史, 他
    • Organizer
      第34回日本造血細胞移植学会
    • Place of Presentation
      大阪:大阪国際会議場
    • Year and Date
      20120224-25
  • [Presentation] 成人臍帯血移植患者におけるアンホテリシンBリポゾーム製剤投与の有効性と安全性の評価2012

    • Author(s)
      前浩史, 他
    • Organizer
      第34回日本造血細胞移植学会
    • Place of Presentation
      大阪:大阪国際会議場
    • Year and Date
      20120224-25
  • [Presentation] 3回の同種臍帯血移植後の再発ALLに対し非〓解期でのT細胞非除去HLA半合致移植を施行した一例2012

    • Author(s)
      望月慎史, 他
    • Organizer
      第34回日本造血細胞移植学会
    • Place of Presentation
      大阪:大阪国際会議場
    • Year and Date
      20120224-20120225
  • [Presentation] Suppressed neutrophil development in hematopoiesis of induced pluripotent stem cells derived from a severe congenital neutropenia patient with ELA2 mutation2011

    • Author(s)
      Hiramoto T., et al
    • Organizer
      53^<rd> ASH Annual Meeting
    • Place of Presentation
      San Diego, USA
    • Year and Date
      20111210-20111213
  • [Presentation] Matched HLA Haplotype Contributes to Reduce Sever Acute GVHD with Conserving GVL Effect in HLA-Mismatched Cord Blood Transplantation2011

    • Author(s)
      Takahashi S., et al.
    • Organizer
      53^<rd> ASH Annual Meeting
    • Place of Presentation
      San Diego, USA
    • Year and Date
      20111210-13
  • [Presentation] GVL effect" closely related with moderate aGVHD on CBT2011

    • Author(s)
      河北敏郎, 他
    • Organizer
      第73回日本血液学会学術集会
    • Place of Presentation
      名古屋:名古屋国際会議場
    • Year and Date
      20111014-20111016
  • [Presentation] Analysis of impaired hematopoiesis in Down syndrome using patient iPScells2011

    • Author(s)
      望月慎史, 他
    • Organizer
      第73回日本血液学会学術集会
    • Place of Presentation
      名古屋:名古屋国際会議場
    • Year and Date
      20111014-16
  • [Presentation] 患者由来iPS細胞を用いたダウン症候群における造血障害の解析2011

    • Author(s)
      望月慎史, 他
    • Organizer
      第114回日本小児科学会学術集会
    • Place of Presentation
      東京:高輪プリンスホテル
    • Year and Date
      20110812-14
  • [Presentation] I Induction of hematopoiesis from human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) in coculture with autologus hiPSC-derived mesenchymal stem cells under animal serum-free conditions2011

    • Author(s)
      Ebihara Y., et al
    • Organizer
      9^<th> ISSCR Annual Meeting
    • Place of Presentation
      Toronto, Canada
    • Year and Date
      20110615-20110618
  • [Presentation] 重症先天性好中球減少症患者由来のiPS細胞の樹立とその解析2011

    • Author(s)
      平本貴史, 他
    • Organizer
      第32回日本炎症・再生医学会
    • Place of Presentation
      京都:京都国際会館
    • Year and Date
      20110602-03
  • [Presentation] 動物細胞・動物血清を用いないヒトiPS細胞から血液細胞への分化誘導2011

    • Author(s)
      海老原康博
    • Organizer
      第21回日本サイトメトリー学会
    • Place of Presentation
      京都:京都国際交流会館
    • Year and Date
      2011-06-25
  • [Book] 今日の小児治療指針(第15版)2012

    • Author(s)
      辻浩一郎
    • Total Pages
      527-529
    • Publisher
      医学書院
  • [Book] Stem Cells in Medicine2011

    • Author(s)
      Ma, F., et al
    • Total Pages
      51-70
    • Publisher
      Transworld Research Network, Kerala
  • [Book] Embryonic Stem Cells2011

    • Author(s)
      Ma, F., et al
    • Total Pages
      239-250
    • Publisher
      Intech, Vienna
  • [Book] Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells2011

    • Author(s)
      Ma, F., et al
    • Total Pages
      266-335
    • Publisher
      Springer Science, New York
  • [Remarks] 東京大学医科学研究所幹細胞治療研究センター幹細胞プロセシング分野

    • URL

      http://stemcell-u-tokyo.org/scp/

  • [Patent(Industrial Property Rights)] ヒト由来の多能性幹細胞を分化させる方法2011

    • Inventor(s)
      辻浩一郎、海老原康博
    • Industrial Property Rights Holder
      東京大学
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2011/072609
    • Filing Date
      2011-09-30
    • Overseas
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 多能性幹細胞からの好酸球の製造方法2011

    • Inventor(s)
      辻浩一郎、馬峰、斎藤博久、松本健治、中畑龍俊
    • Industrial Property Rights Holder
      京都大学
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2011/077955
    • Filing Date
      2011-12-02
    • Overseas

URL: 

Published: 2013-06-26  

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