涙液中アミノ酸発現が眼表面疾患の病態に及ぼす影響

2012 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23659818
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 外園 千恵 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30216585)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 奥村 直毅 同志社大学, 公私立大学の部局等, 助教 (10581499)
• Keywords: アミノ酸 / 角膜 / 上皮細胞 / タイトジャンクション / 涙液

Research Abstract

SV40不死化ヒト培養角膜上皮細胞を用いて、アミノ酸がタイトジャンクションに及ぼす影響を検討した。具体的には、ヒト培養角膜上皮細胞をコンフルエントになるまで培養し、20種のアミノ酸を含むFULL培地、アミノ酸を全て抜いたZERO培地、FULL培地より特定のアミノ酸のみを欠損させた欠損培地、ZERO培地に特定のアミノ酸（各10mM）を添加した添加培地に交換して、継時的に電気抵抗値 (Ω・cm２)を測定した。完全培地は対照培地に比べて経時的に電気抵抗が高くなり、アミノ酸含有が細胞間接着を高めていると推測された。検討したアミノ酸20種のなかではArg欠損培地において電気抵抗値の低下が著明であり、Glu欠損培地、Asn欠損培地においても電気抵抗値が低下した。添加培地では、Asn添加培地、Glu添加培地、Ala添加培地、Arg添加培地においてほぼ同等の電気抵抗値の促進効果を認めた。
以上の結果は昨年に実施したヒト培養角膜上皮細胞の増殖性の検討、in vitroでの創傷治癒の検討結果と整合性が合い、Arg、Glu、Asn、Alaがヒト角膜上皮の健常性維持あるいは創傷治癒に関与ている可能性が高いと考えられた。
そこでArg/Gln　40mM、Ala/Asn/Gln　40mMを含有する人工涙液を用いて、健常者およびドライアイ患者での自覚症状、他覚所見の変化を検討した。いずれの配合も健常者への頻回点眼で異常所見を生じず、ドライアイ患者では自覚症状が改善もしくは不変、他覚所見は軽度改善もしくは不変であった。このことより、アミノ酸配合が新たな人工涙液となりうる可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Visual Improvement after Cultivated Oral Mucosal Epithelial Transplantation (2013)
  • Author(s): Sotozono C, Inatomi T, Nakamura T, Koizumi N, Yokoi N, Ueta,M, Matsuyama K, Miyakoda K, Kaneda H, Fukushima M, Kinoshita S
  • Journal Title: Ophthalmol Volume: 120(1) Pages: 193-200
  • DOI: DOI:10.1016/j.ophtha.2012.07.053
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The ROCK Inhibitor Eye Drop Accelerates Corneal Endothelium Wound Healing. (2013)
  • Author(s): Okumura N, Koizumi N, Kay EP, Ueno M, Sakamoto Y, Nakamura S, Hamuro J, Kinoshita S
  • Journal Title: Invest Ophthalmol Vis Sci Volume: 54(4) Pages: 2493-2502
  • DOI: DOI:10.1167/iovs.12-11320
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Inhibition of TGF-β signaling enables human corneal endothelial cell expansion in vitro for use in regenerative medicine. (2013)
  • Author(s): Okumura N, Kay EP, Nakahara M, Hamuro J, Kinoshita S, Koizumi N
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 8(2) Pages: e58000
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0058000
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epistatic interaction between Toll-like receptor 3 (TLR3) and prostaglandin E receptor 3 (PTGER3) genes. (2012)
  • Author(s): Ueta M, Tamiya G, Tokunaga K, Sotozono C, Ueki M, Sawai H, Inatomi T, Matsuoka T, Akira S, Narumiya S, Tashiro K, Kinoshita S
  • Journal Title: Epistatic interaction between Toll-like receptor 3 (TLR3) and prostaglandin E receptor 3 (PTGER3) genes. Volume: 129(5) Pages: 1413-1416.e11
  • DOI: DOI:10.1016/j.jaci.2012.01.069
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Development of new therapeutic modalities for corneal endothelial disease focused on the proliferation of corneal endothelial cells using animal models (2012)
  • Author(s): Koizumi N, Okumura N, Kinoshita S
  • Journal Title: Exp Eye Res Volume: 95(1) Pages: 60-67
  • DOI: DOI:10.1016/j.exer.2011.10.014
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Expression of prostaglandin E receptor subtype EP4 in conjunctival epithelium of patients with ocular surface disorders: case-control study. (2012)
  • Author(s): Ueta M, Sotozono C, Yamada K, Yokoi N, Inatomi T, Kinoshita S
  • Journal Title: BMJ Open Volume: 2(5) Pages: e001330
  • DOI: 10.1136/bmjopen-2012-001330
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prostaglandin E2 Suppresses Poly I: C-Stimulated Cytokine Production Via EP2 and EP3 in Immortalized Human Corneal Epithelial Cells. (2012)
  • Author(s): Ueta M, Matsuoka T, Sotozono C, Kinoshita S
  • Journal Title: Cornea Volume: 31(11) Pages: 1294-1298
  • DOI: 10.1097/ICO.0b013e318242fd7c
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Downregulation of monocyte chemoattractant protein 1 expression by prostaglandin e2 in human ocular surface epithelium. (2012)
  • Author(s): Ueta M, Sotozono C, Yokoi N, Kinoshita S
  • Journal Title: Arch Ophthalmol Volume: 130(2) Pages: 249-251
  • DOI: 10.1001/archopthalmol.2011.1472
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The relation between visual performance and clinical ocular manifestations in stevens-johnson syndrome. (2012)
  • Author(s): Kaido M, Yamada M, Sotozono C, Kinoshita S, 他5名
  • Journal Title: Am J Ophthalmol Volume: 154(3) Pages: 499-511
  • DOI: 10.1016/j.ajo.2012.03.044
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A selective inhibitor of the Rho kinase pathway, Y-27632, and its influence on wound healing in the corneal stroma. (2012)
  • Author(s): Yamamoto M, Quantock AJ, Young RD, Okumura N, Ueno M, Sakamoto Y,Kinoshita S,Koizumi N
  • Journal Title: Mol Vis Volume: 18 Pages: 1727-1739
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A ROCK inhibitor converts corneal endothelial cells into a phenotype capable of regenerating in vivo endothelial tissue. (2012)
  • Author(s): Okumura N, Koizumi N, Ueno M, et al
  • Journal Title: Am J Pathol Volume: 181(7) Pages: 268-277
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2012.03.033
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Etiologic Features of Stevens-Johnson syndrome (SJS) and Toxic Epidermal Necrolysis (TEN) with Ocular Involvement. (2012)
  • Author(s): Sotozono C, Ueta M, Kinoshita S, Kitami A, Iijima M, Aihara M, Ikezawa Z, Kano Y, Shiohara T, Shirakata Y, Sakabayashi S, Matsubara Y, Hashimoto K
  • Organizer: Annual Meeting of the American Academy of Ophthalmology
  • Place of Presentation: Chicago, USA
  • Year and Date: 20121111-20121111