異所性酵素によるＤＮＡメチル化とモノアミン神経障害

2011 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23659873
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 北山 滋雄 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (80177873)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 十川 千春 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (10253022) ; 十川 紀夫 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (30236153)
• Project Period (FY): 2011-04-28 – 2013-03-31
• Keywords: 遺伝子 / エピジェネティクス / シグナル伝達 / 脳神経疾患 / 発現制御 / カテコールアミン

Research Abstract

遺伝子発現のエピジェネティックな調節機構であるDNAメチル化の異常は，細胞生存にとって重要な影響をもたらす。ドパミン神経の選択的変成脱落を特徴とするパーキンソン病(PD)においてその発症に遺伝的因子の関与は知られているが，エピジェネティックな機構の関与については明らかでない。本研究の目的は，異所性に核に発現するカテコールアミン代謝酵素がDNAメチル化をもたらすこと，それが緩徐な細胞死に係わることを明らかにすることである。このためカテコールアミン代謝酵素であるCOMT/PNMTの核内発現とそれがもたらす過剰あるいは異常なDNAメチル化の状態を明らかにすべく，カテコールアミン神経細胞の表現型を備えるSK-N-AS細胞を用いて解析を行った。血清除去によるストレス下でPNMTの発現が上昇し，それに伴い核内への移行が生じた。この時，総量としてのDNAメチル化には変化が認められなかった。メチル化のパターンに変化が現れているか否かを今後解析する予定である。また，核移行シグナルを付加したCOMT, PNMT cDNAを発現ベクターに組み込み，SK-N-AS細胞に導入する系を現在作成中であり，これを用いることでより詳細なDNAメチル化の動態を解析する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究は当初の計画に沿って進行しており，不測の事態は特に生じていない。

Strategy for Future Research Activity

メチル化のパターンを解析し，血清除去により生じるメチル化遺伝子の同定を行う。核移行シグナルを付加したCOMT, PNMT cDNAを用い，SK-N-AS細胞でより詳細なDNAメチル化の動態を解析する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

繰り越した費用は発現用コンストラクトの作成に要するもので，H23年度末から次H24年度にかけ使用するので，次年度の研究計画に大きな変化はなく，次年度研究経費は当初の計画通りに執行する予定である。