2011 Fiscal Year Research-status Report
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23659940
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
黒田 真司 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (50323689)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
春日井 昇平 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (70161049)
中田 秀美 東京医科歯科大学, 歯学部附属病院, 医員 (30451967)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | 脂肪由来幹細胞 / 遺伝子導入 / 骨 / アデノウィルス / 骨形成誘導因子 |
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| Research Abstract |
幹細胞に関する研究の躍進は甚だしく、特に体細胞から初期化によって得られる iPS細胞は、任意の細胞へと分化誘導されることから、組織再生医学あるいは再生医療においても非常に画期的である。ところでそれぞれの組織にはその前駆体や未分化な細胞が含まれており、それらを特定の細胞へ分化誘導する場合、必ずしも初期化が必要ではない。そこで、容易に採取出来る脂肪組織から、脱分化脂肪細胞あるいは脂肪由来幹細胞を培養し、その立体培養コンストラクトの移植実験によって、同じ間葉系組織である骨組織の骨再生(骨形成)を小動物の骨欠損部において試みる。皮下脂肪は技術的に採取が容易であり、患者への外科的侵襲が極めて小さい。さらに骨髄よりも多くの幹細胞が含まれているため、効率のよい骨芽細胞分化が期待されることから、移植までの工程を短縮できる可能性が示唆される。当該年度では、脂肪細胞を脂肪組織より単離・培養および脱分化させることに成功したものの、長期培養による多分化能を確認するには至っていない。一方で、脂肪由来幹細胞を分離して培養することに成功し、長期培養によって未分化のままスフェロイドを形成後、長期間維持されることが確認された。これは、ES細胞やiPS細胞に似た様相であり、さらに立体培養する上で適していると考えられる。次に、骨形成誘導因子であるbmp2のアデノウィルスベクターの作製に成功した。アデノウィルスによる遺伝子導入は効率が良く、永続的なタンパク発現はなく、一過性の発現機序を持つため安全性も高い。本研究では今後、bmp2の遺伝子導入によって、脱分化脂肪細胞あるいは脂肪由来幹細胞の効率の良い骨芽細胞分化を獲得し、骨再生（骨形成）促進を目指す。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
脂肪細胞および脂肪由来幹細胞の分離・培養の確立に時間が掛かったことから、生体親和性スキャフォルドを用いた立体培養に至っていない。さらにアデノウィルスベクターの作製にも時間を費やしたことから、実験計画にやや遅れが生じた。しかしながら、確実に進行し、結果をえている。
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| Strategy for Future Research Activity |
遺伝子導入による骨芽細胞分化を獲得すること、そして立体培養の確立を早期に行い、骨芽細胞分化を組織学的、分子生物学的に評価する。また、脂肪由来幹細胞をいくつかの細胞膜抗原によってソーティングし、同様に骨芽細胞分化を評価する。次に、立体培養コンストラクトを小動物の皮下あるいは骨欠損部に移植し骨形成・骨再生を評価する。本研究における脂肪由来の細胞の骨芽細胞分化および骨形成は、骨髄細胞を用いた場合の結果と比較する予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
試薬、動物など、基本的には消耗品の購入がほとんどであり、成果発表のための学術大会参加費なども含まれる。
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