2012 Fiscal Year Research-status Report
細胞破壊と細胞組み込みによる新たな悪性腫瘍治療法の開発
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23659942
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
日比 英晴 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90345885)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上田 実 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00151803)
山本 朗仁 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50244083)
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| Keywords | 再生医学 / 細胞・組織 / 歯学 / 移植・再生医療 |
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| Research Abstract |
本年度は定量的な評価をした．下顎骨の片側を区域切除し，形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，それに①細胞なし，②骨髄単核細胞，③培養骨髄間質細胞のそれぞれを組み込んだうえで再植し，その後の治癒過程をＸ線学的，組織学的に評価した．組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．具体的な実験概要は以下の通りである．
１．実験動物：ラットを用いた．
２．細胞培養：骨髄液を採取し，骨髄間質細胞を分離，培養し増殖させた．培養過程で細胞を蛍光標識した．
３．手術および骨片等処理：術中に以下の（１）から（５）まで進めた．
（１）下顎骨部分切除：下顎片側だけ下顎骨角部から骨膜を含めて部分切除をした．（２）骨片の液体窒素凍結処理：ヘパリン加生食水で洗浄し骨膜を除去した骨片に，凍結時の破折防止のため1mm間隔で皮質骨を穿孔した．骨片を液体窒素中に10分間浸漬した後に5分間の室温放置，5分間の生食水中浸漬をした．（３）骨髄単核細胞分離：骨髄液をから，percoll密度勾配遠心法により単核細胞分画を調製した．細胞は蛍光標識をした．（４）組み込み処理とその条件設定：骨片の穿孔部から次の一定量を注入した．対照群①細胞なし（リン酸緩衝液），実験群②骨髄単核細胞，③骨髄間質細胞とした．（５）再植：骨片を復位し固定し顎下部を閉創した．
４．評価：術後２，４，８週でＸ線学的および組織学的に骨片とその周囲を観察した．蛍光顕微鏡像を画像解析し，それぞれから骨微細構造と細胞の動態を把握し，結果を評価した．形成した骨片に液体窒素凍結処理を施し，組み込む細胞の種類，数，分化度，適用方法を変数にした条件を設定し，組み込み処理についての至適条件を，さらにその条件の組み合わせにより最適条件を求めた．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究計画に無理がなく，その内容が妥当であったためであると考える．
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| Strategy for Future Research Activity |
平成２３，２４年度に得られた結果を基にして，臨床への応用および展開を視野に入れて検討する．
骨片に骨膜付きの条件も設定し，生着に及ぼす影響を調べる．さらに骨以外に筋や神経，血管についても同様の試みを検討する．それらは単体のみならず，骨を中心に複合した状態も想定する．
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
該当なし．
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[Journal Article] Novel application of stem cell-derived factors for periodontal regeneration2013
Author(s)
Inukai, T., Katagiri, W., Yoshimi, R., Osugi, M.,Kawai, T., Hibi, H., Ueda, M
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Journal Title
Biochemical and Biophysical Research Communications
Volume: 430(2)
Pages: 763-768
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Mesenchymal stromal cells of human umbilical cord Wharton's jelly accelerate wound healing by paracrine mechanisms2012
Author(s)
Shohara, R.,Yamamoto, A.,Takikawa, S., Iwase, A., Hibi, H., Kikkawa, F., Ueda, M
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Journal Title
Cytotherapy
Volume: 14(10)
Pages: 1171-1181
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Conditioned media from mesenchymal stem cells enhanced bone regeneration in rat calvarial bone defects2012
Author(s)
Osugi, M.,Katagiri, W.,Yoshimi, R., Inukai, T., Hibi, H., Ueda, M
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Journal Title
Tissue Engineering Part A
Volume: 18(13-14)
Pages: 1479-1489
DOI
Peer Reviewed
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