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2012 Fiscal Year Annual Research Report

上皮・実質・内皮幹細胞のエピジェネティク分化制御による革新的な三次元的角膜の再生

Research Project

Project/Area Number 23689072
Research InstitutionTokyo Women's Medical University

Principal Investigator

三村 達哉  東京女子医科大学, 医学部, 講師 (70463867)

Project Period (FY) 2011-04-01 – 2014-03-31
Keywordsエピジェネティクス / 角膜再生 / 幹細胞移植
Research Abstract

本研究は、角膜の細胞の老化に関わる変化を見ることを目的としている。老化した細胞や培養細胞ではDNAレベルの変化なしに遺伝子発現が変化するエピジェネティクス化が生じることが近年明らかになっているが角膜疾患については、まだ解明されていない。本年度までに我々は、研究用ヒトドナー角膜の角膜上皮、実質、内皮の各層より細胞を採取し、培養した。また、選択的に未分化な細胞を採取するために、スフェアー法という方法により、角膜上皮、実質、内皮の各層から組織幹細胞/前駆細胞を採取することに成功した。採取した細胞を免疫染色ならびにRT-PCRで遺伝子発現を調べると、通常の細胞と比較して、スフェアーを形成する細胞はBrDUの取り込みが高く、また上皮では上皮未分化マーカーであるp63が発現しており、神経堤由来である実質と内皮のスフェアーは神経未分化マーカーであるNestinが強く発現していた。また、ヒトドナー角膜の、中央部分と周辺部分にわけて、それぞれ角膜上皮、実質、内皮細胞を採取した。また年齢によって遺伝子のメチレーションに差があるか調べるために、マウスの生後1週目の角膜と生後10か月目の高齢マウスから、それぞれ角膜上皮と内皮細胞を採取した。このうち、角膜内皮に関しては、角膜透明性維持に必要なポンプ機能に関する遺伝子群が角膜周辺部よりも中央部で遺伝子のメチルカ率が高く老化している可能性を証明した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の予定通り、細胞を採取し、それらの細胞のキャラクタライズを調べた。また、角膜内皮の全遺伝子配列を次世代シークエンサーにより解析し、どの遺伝子がメチル化を起こしているか、解析した。これらの研究の進捗状況は予定以上に進んでおり、次年度の研究につながると考えられる。

Strategy for Future Research Activity

3年間の研究の予定に変更はない。当初の予定通り、次年度は培養細胞と幹細胞のメチレーションのパターンの差を解析する予定である。また選択的に未分化な状態の細胞を選択的に採取をすることにより、細胞のシートをの作成も検討している。

  • Research Products

    (10 results)

All 2013 2012 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (5 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] . Corneal Endothelial Regeneration and Tissue Engineering..2013

    • Author(s)
      Mimura T, Yamagami S, Amano S
    • Journal Title

      Prog Retin Eye Res

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1016/j.preteyeres.2013.01.003.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Vitreous inflammatory factors and macular oedema.2012

    • Author(s)
      Funatsu H, Noma H, Mimura T, Eguchi S.
    • Journal Title

      Br J Ophthalmol.

      Volume: 96 Pages: 302-304

    • DOI

      10.1136/bjo.2010.181222

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Conjunctivochalasis: associations with pinguecula in a hospital-based study.2012

    • Author(s)
      Mimura T, Mori M, Obata H, Usui T, Yamagami S, Funatsu H, Noma H, Amano S.
    • Journal Title

      Acta Ophthalmol.

      Volume: 90 Pages: ):773-782.

    • DOI

      10.1111/j.1755-3768.2011.02161.x

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Pinguecula and diabetes mellitus.2012

    • Author(s)
      Mimura T, Obata H, Usui T, Mori M, Yamagami S, Funatsu H, Noma H, Amano S.
    • Journal Title

      Cornea

      Volume: 31 Pages: 264-268.

    • DOI

      10.1097/ICO.0b013e3182254170

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Tissue engineering of corneal endothelium.2012

    • Author(s)
      Mimura T, Yokoo S, Yamagami S.
    • Journal Title

      J. Funct. Biomater.

      Volume: 3 Pages: 726-744

    • DOI

      10.3390/jfb3040726

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] イムノキャップラピッドを用いた涙液中特異的IgEと皮膚プリックテストの比較

    • Author(s)
      三村達哉、山上聡、臼井智彦、宮井尊史、天野史郎
    • Organizer
      第116回日本眼科学会総会
    • Place of Presentation
      東京国際フォーラム
  • [Presentation] アレルギー性結膜炎患者涙液中の小麦特異的IgE

    • Author(s)
      三村達哉、亀井裕子、五嶋摩理、近藤亜紀、松原正男
    • Organizer
      第66回日本臨床眼科学会
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館・グランドプリンスホテル京都
  • [Presentation] 細隙灯顕微鏡所見を正確にとるための解剖学・生理学

    • Author(s)
      三村達哉
    • Organizer
      角結膜疾患診療ナビ 学術講演会
    • Place of Presentation
      東京ステーションホテル
    • Invited
  • [Presentation] ヒト角膜内皮細胞の全ゲノム解析によるDNAメチル化プロファイル

    • Author(s)
      三村達哉、中川卓、山上聡、天野史郎
    • Organizer
      角膜カンファランス2013
    • Place of Presentation
      和歌山県 南紀白浜
  • [Presentation] Specific Tear IgE in Seasonal Allergic Conjunctivitis with ImmunoCAP Rapid

    • Author(s)
      Tatsuya Mimura, Satoru Yamagami, Tomohiko Usui, Takashi Miyai, Shiro Amano
    • Organizer
      The Assosiation for Research in Vision and Ophthalmology
    • Place of Presentation
      Greater Fort Lauderdale/Broward County Convention Center

URL: 

Published: 2014-07-24  

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