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2011 Fiscal Year Research-status Report

DJ-1の膜輸送への役割に関する研究

Research Project

Project/Area Number 23700389
Research InstitutionJuntendo University

Principal Investigator

波田野 琢  順天堂大学, 医学部, 准教授 (60338390)

Project Period (FY) 2011-04-28 – 2013-03-31
KeywordsDJ-1 / 家族性パーキンソン病 / Synaptophysin / Rab3A / FRET / Immunoisolation
Research Abstract

培養細胞,初代神経培養を用いた細胞免疫染色法でDJ-1の細胞内局在を検討したところ,Rab3Aおよびsynaptophysin(SYP)と共局在した.また,マウス脳のシナプトソーム画分をショ糖密度勾配法で分画し,各種小胞マーカーの抗体およびDJ-1抗体を用いてウェスタンブロッティング法で検討し,免疫染色と同様にRab3AおよびSYPに局在する事を確認した.リコンビナントDJ-1蛋白は細胞膜やシナプトソームのplasma membraneに結合する事を明らかにした.さらに変異型DJ-1が膜結合能への変化を検討したところ,L166P変異体はplasma membraneへの結合能が低下していた.Immunoisolation法で,DJ-1が局在しているシナプス小胞を分離し検討したところ,SYPと同じ小胞に局在していた.DJ-1がシナプス小胞に局在し,実際にどのような機能に関わるかを検討する目的でFRET法を用いてSYPとDJ-1がliving cellで相互作用するかどうかを検討した.DJ-1の一部は少ないながらも確実にSYPとFRET現象を起こすことが確認され相互作用することがわかった.この現象は細胞内で顆粒状に認められており小胞上で相互作用する可能性が示唆された.SynaptophysinおよびRab3Aはエクソサイトーシスされる小胞に局在する事が知られている.つまり,これらの蛋白と共局在し相互作用することはDJ-1が放出機能に関わると考えられ,L166P変異DJ-1は膜への結合が低下することが病態に関与している事が考えられた.本研究成果はNeurobiology of Disease誌に掲載された.Usami Y, Hatano T, Imai S et al. Neurobiology of Disease 2011;43:651-652

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

当初の計画以上に進展し,DJ-1がシナプス小胞に局在する事を示し,エクソサイトーシスに関わる蛋白,小胞に関連することを明らかにした.この結果はNeurobiology of diseaseに掲載された.

Strategy for Future Research Activity

家族性パーキンソン病関連蛋白の中で膜輸送と関連する可能性のあるものに関してdrosophila modelを用いて検討し,そこにDJ-1が関わるか検討していく

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

Drosophila modelを解析するために試薬,抗体を購入する.

  • Research Products

    (8 results)

All 2011

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (4 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] DJ-1 associates with synaptic membranes.2011

    • Author(s)
      Usami Y, Hatano T, Imai S, Kubo S, Sato S, Saiki S, Fujioka Y, Ohba Y, Sato F, Funayama M, Eguchi H, Shiba K, Ariga H, Shen J, Hattori N.
    • Journal Title

      Neurobiology of Disease

      Volume: 43 Pages: 651-662

    • DOI

      doi:10.1016/j.nbd.2011.05.014

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Pramipexole reduces the prevalence of fatigue in patients with Parkinson’s disease.2011

    • Author(s)
      Morita A, Okuma Y, Kamei S, Yoshii F, Yamamoto T, Hashimoto S, Utsumi H, Hatano T, Hattori N, Matsumura M, Takahashi K, Nogawa S, Watanabe Y, Miyamoto T, Miyamoto M, Hirata K.
    • Journal Title

      Internal Medicine

      Volume: 50 Pages: 2163-2168

    • DOI

      DOI: 10.2169/internalmedicine.50.5456

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The effect of Ndrg2 expression on astroglial activation.2011

    • Author(s)
      Takeichi T, Takarada-Iemata M, Hashida K, Sudo H, Okuda T, Kokame K, Hatano T, Takanashi M, Funabe S, Hattori N, Kitamura O, Kitao Y, Hori O.
    • Journal Title

      Neurochemistry International

      Volume: 59 Pages: 21-27

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] パーキンソン病患者の服薬状況に関するアンケート調査2011

    • Author(s)
      波田野 琢 他
    • Organizer
      第52回日本神経学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場
    • Year and Date
      2011 – 520
  • [Presentation] シンポジウム パーキンソン病の病態から臨床 up date; 治療2011

    • Author(s)
      波田野 琢
    • Organizer
      第52回日本神経学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場
    • Year and Date
      2011 – 520
  • [Presentation] DJ-1はシナプス小胞に局在する2011

    • Author(s)
      波田野 琢 他
    • Organizer
      第30回 日本認知症学会
    • Place of Presentation
      タワーホール船堀
    • Year and Date
      2011 – 1111
  • [Presentation] DJ-1はシナプス小胞に局在する2011

    • Author(s)
      波田野 琢 他
    • Organizer
      第5回 日本パーキンソン病・運動障害疾患学会
    • Place of Presentation
      品川プリンスホテル
    • Year and Date
      2011 – 106
  • [Book] Etiology and Pathophysiology of Parkinson’s disease.2011

    • Author(s)
      Hatano T, Hattori N
    • Total Pages
      1-14
    • Publisher
      InTech

URL: 

Published: 2013-07-10  

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