単一細胞にシナプス入力する神経回路と視覚機能を同時に可視化し解析する試み

2012 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23700419
• Research Institution: National Institute for Physiological Sciences
• Principal Investigator: 森 琢磨 生理学研究所, 生体情報研究系, 助教 (70545798)
• Keywords: 神経トレーサー

Research Abstract

前年度に作成した糖タンパク質欠損狂犬病ウイルスを用いて、大脳新皮質２／３層錐体細胞に直接シナプス結合するシナプス前細胞の可視化を行った。エレクトロポレーション法によってプラスミドを２／３層錐体細胞へ導入されたマウスにシュードタイプされた糖タンパク質欠損狂犬病ウイルスを注入した結果、２／３層錐体細胞は、４層神経細胞および５層神経細胞からおもなシナプス入力を受けている事が明らかになった。さらに、神経細胞形態をゴルジ染色様に可視化できる本ウイルスベクターの特性を活かし、細胞形態の詳細な解析を行った。
また、単一細胞へのプラスミド導入効率を向上させるべく、より精密なピペット操作ができるin vivo manipulatorを購入し、組織への障害が少なく、効率のよい条件を検討した。
研究期間全体で、ヒトワクチン株に基づく糖タンパク質欠損狂犬病ウイルスを作成し、それに最適化された越シナプストレース法を開発した。そしてそのトレース法を用い大脳新皮質２／３層錐体細胞に直接シナプス結合するシナプス前細胞の分布様式を解析した。