リポ蛋白リパーゼトランスジェニックウサギを用いたエネルギー代謝研究

2012 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23700835
• Research Institution: Saga University
• Principal Investigator: 西田 裕一郎 佐賀大学, 医学部, 助教 (50530185)
• Keywords: 肥満 / エネルギー消費 / 二重標識水

Research Abstract

本研究の目的は、肥満に対して抵抗性をもつリポ蛋白リパーゼトランスジェニック（LPL-Tg）ウサギを用いて、エネルギー消費量やエネルギー代謝にかかわる骨格筋・脂肪の遺伝子の発現や血中ホルモンを測定し、肥満になりにくいメカニズムを探索することである。本研究では先ず、二重標識水を使用してウサギのエネルギー消費量を精度よく測定する方法の開発に取り組んだ。その結果、二重標識水注入4時間後と７日後の２時点において血液採取を行うプロトコールを用いることで、ウサギのエネルギー消費量を効率的かつ正確に測定できることを見出した。この方法を用いて通常食下で26週齢の野生型ウサギのエネルギー消費量を測定した結果、平均で340.1 ± 9.3 kcal/日であり、体脂肪率は16.0 ± 1.4%であった。
通常食を与えた状態でLPL-Tgウサギ（雄, n=12）とコントロール（雄, n=12）のエネルギー消費量を上述の方法で測定し、次に、両群のウサギに16週間高脂肪食を与えた後に、再度、二重標識水法によるエネルギー消費量の測定と静注糖負荷テストを実施し、エネルギー代謝関連遺伝子（脱共役タンパク質など）の発現量を測定する目的で骨格筋（腓腹筋とヒラメ筋）や脂肪組織（内臓脂肪と皮下脂肪）等の組織を採取した。全ての被験動物の血中脂質の測定（中性脂肪、HDLコレステロール、LDLコレステロール）とエネルギー代謝関連の血中物質の測定（甲状腺ホルモン、遊離脂肪酸、CRP）とエネルギー消費量測定用に採取した血液(血漿)の二重標識水濃度の分析は終了した。現在、測定された二重標識水濃度からのエネルギー消費量の解析と採取した組織のエネルギー代謝関連遺伝子の発現解析が進行中である。