2014 Fiscal Year Annual Research Report
癌幹細胞を標的治療するＣＤ１３３反応性増殖型アデノウイルスの開発
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23701062
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
王 宇清 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 特任研究員 (20505143)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2015-03-31
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| Keywords | 腫瘍生物学 / 癌幹細胞 / 遺伝子治療 / アデノウイルス / 国際研究者交流 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、治療抵抗性の原因となる癌幹細胞を標的として、同定・診断・治療可能な増殖制御型アデノウイルスベクターを構築、検証するものであって、本課題は以下の3点について明らかにする予定。① 癌幹細胞の表面マーカーと報告されたCD133が真の癌幹細胞マーカーであることの確認。② 癌幹細胞の細胞学的・遺伝子学的特徴の解明。③ 癌幹細胞に標的治療する増殖制御型アデノウイルスベクター（CD133反応性m-CRA）の構築と検証。
平成23年度から研究計画通りに以下のことを進めてきた。① CD133の発現に制御するプロモーター活性を解析するため、五つのプロモーターをクローニングし、非増殖型アデノウイルスベクターに組み込むことができた。② それを用いて、CD133高発現する消化器癌細胞株と臨床グリオブラストーマから浮遊細胞塊形成法で濃縮してきた神経癌幹細胞におけるCD133プロモーターの制御活性を解析し、癌細胞より癌幹細胞にはCD133のプロモーター活性が顕著に高いと示された。③ CD133遺伝子発現癌幹細胞をターゲッティングする増殖型アデノウイルスベクター(CD133反応性m-CRA)を構築した。④ CD133反応性m-CRAを用いて、各種のCD133発現する癌細胞株と癌幹細胞に感染し、in vitroの治療効果を検証できた。CD133発現癌細胞株と癌幹細胞にCD133反応性m-CRAは有意な癌細胞と癌幹細胞の殺傷効果が示された。一方、正常細胞にCD133反応性m-CRAの毒性が見られなくて、in vitroの安全性も示された。⑤ さらに、NOD-SCID免疫不全マウスを用いて、癌幹細胞の腫瘍形成能を確認し、ex vivoの実験でCD133反応性m-CRAの腫瘍抑制作用の検証実験を進めることができた。⑥ Tumor sphere assayを用いて、細胞表面CD133と内因性CD133の制御による癌幹細胞特異性の検証し、CD133のpromoterの5制御した癌幹細胞特異性が示唆された。
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