2011 Fiscal Year Research-status Report
加水分解酵素による殺虫剤の解毒代謝を解明してヒトと実験動物との種差を検証する
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23710042
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
西 甲介 愛媛大学, 農学部, 助教 (80578097)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| Keywords | 殺虫剤 / 加水分解 / エステラーゼ / 種差 / ピレスロイド |
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| Research Abstract |
エステル結合やアミド結合を構造中に含む殺虫剤は、その多くが体内で加水分解されて解毒される。しかし、殺虫剤の毒性評価に用いる実験動物とヒト間では加水分解に関わる薬物代謝酵素の分子種数や発現組織の分布が大きく異なっており、各々の酵素に関しても代謝活性や基質選択性が異なる可能性が大きい。そこで本研究では、ヒトでの安全性をより正確に評価するために、遺伝子組換えヒト加水分解酵素を用いて殺虫剤の加水分解的解毒代謝に関わっている酵素種を同定し、その酵素機能を解析して、ヒトと実験動物における加水分解的薬物代謝の種差を明らかにすることを目的とする。まず、ヒト肝臓で発現している種々のエステラーゼおよびアミダーゼ遺伝子を、cDNAライブラリーを鋳型としてPCR法により単離した。大腸菌発現系では多くの遺伝子組換え酵素が活性体として得られず、得られても極微量であったため、バキュロウィルス―昆虫培養細胞発現系を用いて遺伝子組換え酵素を調製し、精製した。その後、エステル結合やアミド結合を構造中に含む種々の殺虫剤を遺伝子組換え酵素に対してスクリーニングを行った。その結果、これまでに報告されていない新規のピレスロイド系殺虫剤の加水分解酵素を発見した。現在、当該酵素の詳細な機能解析を進めている。また、酵素種特異的阻害剤を用いてヒト肝臓S9画分に対して同様にスクリーニングを行った結果、更なる新規ピレスロイド系殺虫剤の加水分解酵素の存在が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究計画調書に示した研究計画どおりに今年度の研究が進んだため。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究計画調書に示した研究計画に沿って研究を進める予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
研究計画調書に示した研究経費の使用予定どおりに使用する計画である。
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