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2013 Fiscal Year Research-status Report

電気化学測定と熱測定の複合システムによる糖質バイオマス分解過程の解析

Research Project

Project/Area Number 23760746
Research InstitutionShinshu University

Principal Investigator

巽 広輔  信州大学, 理学部, 准教授 (60336609)

Keywordsバイオマス / バイオセンサー / カロリメトリー
Research Abstract

申請者は、電気化学測定と熱測定との複合システムを構築することにより、バイオマス加水分解過程の詳細な酵素反応速度論的解析、特にエンド型とエキソ型酵素による協同効果についての定量的解析を行なうことを目指している。昨年度までに、作製した電流計測型バイオセンサーがバイオマス加水分解過程の解析に有用であることを示すことができ、またエンド型とエキソ型酵素による協同効果を検討するため、同センサーをカロリメトリーの測定セルに導入し、電気化学測定と熱測定を同時に行なうことができた。また、エンド型とエキソ型酵素によるバイオマス加水分解の追跡についても、予備的な検討を行なった。速度解析の結果、特にエキソ型酵素の加水分解速度が反応初期において急激に変化していることが明らかになった。しかしながら、電気化学測定と熱測定の相互干渉の問題や、小型のセンサーを簡便かつ再現性良く作製するための方法の改良等、克服しなければならない課題も見出された。そこで平成25年度は、これらの点について検討を進めた。まず、電気化学測定と熱測定の相互干渉の問題については、電気化学測定への熱測定の影響と、熱測定への電気化学測定の影響に分けられる。前者は熱測定系からの電気的ノイズの影響が大きいが、接地を工夫するなどしてこれらの低減を図った。また後者についてはバイオセンサーの電極反応熱を小さくするため、より表面積の小さいセンサーの作製を試みた。小型のセンサーを簡便かつ再現性良く作製するための方法については以前より改良を図ってきたところであるが、平成26年度は酵素の固定化法等に加えて電極素材についても検討を加える予定である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

電流計測型バイオセンサーの小型化およびカロリメトリーセルへの組み込み、ならびにエンド型とエキソ型酵素によるバイオマス加水分解の追跡について一定の成果が得られた。とくにエキソ型酵素の加水分解速度が反応初期において急激に変化していることが明らかになった。

Strategy for Future Research Activity

引き続き電気化学測定と熱測定との複合システムについて検討し、糖質バイオマスの分解過程を追跡する実験を行なう。これまでに見いだされた測定システムの問題点を克服したうえで、今後は実際に種々の糖質バイオマスを用いて条件を変えながら測定を行ないつつ、必要があれば適宜システムに改良を加える。

  • Research Products

    (6 results)

All 2014 2013

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] A graphene screen-printed carbon electrode for real-time measurements2014

    • Author(s)
      Nicolaj Cruys-Bagger, Hirosuke Tatsumi, Kim Borch, Peter Westh
    • Journal Title

      Analytical Biochemistry

      Volume: 447 Pages: 162-168

    • DOI

      dx.doi.org/10.1016/j.ab.2013.11.024

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A pyranose dehydrogenase-based biosensor for kinetic analysis ofenzymatic hydrolysis of cellulose by cellulases2014

    • Author(s)
      cellulasesNicolaj Cruys-Bagger, Silke Flindt Badino, Radina Tokin, Mark Gontsarik, Samin Fathalinejad, Kenneth Jensen, Miguel Duarte Toscano, Trine Holst Sørensen, Kim Borch, Hirosuke Tatsumi, Priit Väljamäe, Peter Westh
    • Journal Title

      Enzyme and Microbial Technology

      Volume: 58-59 Pages: 68-74

    • DOI

      dx.doi.org/10.1016/j.enzmictec.2014.03.002

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] バイオセンサを用いる糖質バイオマス分解過程の解析2013

    • Author(s)
      巽 広輔
    • Journal Title

      Chemical Sensors

      Volume: 29 Pages: 9-14

  • [Journal Article] Transient Kinetics and Rate-Limiting Steps for the Processive2013

    • Author(s)
      Nicolaj Cruys-Bagger, Hirosuke Tatsumi, Guilin Robin Ren, Kim Borch, and Peter Westh
    • Journal Title

      Biochemistry

      Volume: 52 Pages: 8938-8948

    • DOI

      dx.doi.org/10.1021/bi401210n

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 滴下炭素電極を用いるポーラログラフィー2013

    • Author(s)
      田中翔悟、巽 広輔
    • Organizer
      第59回ポーラログラフィーおよび電気分析化学討論会
    • Place of Presentation
      石垣市民会館
    • Year and Date
      20131128-20131201
  • [Presentation] 酵素触媒レドックスサイクリングを用いるOHラジカルの高感度検出2013

    • Author(s)
      巽 広輔
    • Organizer
      第44回中部化学関係学協会支部連合秋季大会
    • Place of Presentation
      静岡大学浜松キャンパス
    • Year and Date
      20131102-20131103
    • Invited

URL: 

Published: 2015-05-28  

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