2013 Fiscal Year Annual Research Report
接着斑分子Ｈｉｃ－５欠損血小板を用いたインテグリン活性化の分子機構の解明
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23791090
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
金山 朱里 昭和大学, 医学部, 講師 (10338535)
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| Keywords | 血小板 / 細胞接着斑分子 |
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| Research Abstract |
本研究課題においてこれまでに、Hic-5（Hydrogen peroxide-induced clone 5）が血小板凝集制御に重要な役割を担っていることが、遺伝子改変マウスを用いた個体レベルでの出血能変化から明らかとなっていた。昨年度は血小板凝集抑制メカニズムについて解析を進め、Hic-5が血小板凝集の直接の担い手であるαIIbβ3の活性化制御に関与していることやHic-5が血小板内でインテグリンαIIbβ3下流に存在していることを示した。さらにαIIbβ3下のHic-5結合分子がHic-5欠損によりインテグリンとの相互作用に変化が起きるか、免疫沈降により他の分子の蛋白量変化を検討し、Hic-5欠損によりαIIbβ3 に結合するアクチン量が減少することが見いだしていた。そこで、その他共沈分子の中に結合量の変化する分子の有無をさらにTOF-MASを用いて検索したが、同定可能なスポットで他に有望な分子は検出されなかった。また昨年度はHic-5欠損マウスにおける血小板凝集抑制メカニズム解析が順調に進展したため、さらなる詳細な解析を行った。方法は血小板凝集関連分子やHic-5の血小板内局在変化について免疫電子顕微鏡法を用いて詳細な検討を試みた。具体的には標識してあるGold colloidの直径を変えることで複数の分子の局在を同時に検出し観察した。しかしインテグリン直下に局在することが知られている他の接着斑分子に関してHic-5欠損血小板におけ特筆すべき変化は検出されなかった。
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