全身性エリテマトーデスにおける自己抗原ＴＲＩＭ２１の治療標的としての可能性の検討

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23791118
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 吉見 竜介 横浜市立大学, 医学部, 助教 (70585265)
• Keywords: 免疫学 / 膠原病学 / 内科学

Research Abstract

＜線維芽細胞の炎症性サイトカイン産生能におけるTRIM21の役割＞　マウスEGFP-TRIM21融合蛋白をNIH3T3細胞株に高発現させると，EGFP-TRIM21の発現量依存的に内在性TRAF6の発現量が低下した．免疫沈降法ではV5-p62の量依存的にEGFP-TRIM21とTRAF6の共沈を認め
た．TRIM21がp62の存在下でTRAF6をユビキチン化することを明らかにした．
＜TRIM68の機能解析＞　TRIM68 cDNAを用いてEGFP-TRIM68融合蛋白発現ベクターを作製し，Flag-IRF融合蛋白発現ベクターとともにHEK293細胞株に高発現して免疫沈降法を行った結果，IRF3およびIRF8とTRIM68の相互作用が示唆された．EGFP-TRIM68を高発現したNIH3T3細胞ではコントロールと比較してpolyI:C刺激によるIFN-βの誘導が抑制された．TRIM68がIRF3およびIRF8をユビキチン化することを明らかにした．
＜SLE・SSの病態でのTRIM21の役割＞　SLE・SS患者，および健常者からPBMCを採取してqPCR法を行った結果，SLE群およびSS群では健常者群と比較してTRIM21 の発現が有意に高かった．SLE群でIRF7，SS群でIRF3，IRF5，IRF7の発現量が健常者群と比べて有意に高かった．I型IFN誘導遺伝子群の発現量もSLE群およびSS群では健常者群と比較して有意に高かった．I型IFNのmRNA発現量はむしろSLE群およびSS群で有意に低かった．健常者ではTRIM21のmRNA発現とI型IFNのmRNAの発現量は逆相関していたが，SLE患者では関連がみられなかった．SLE患者においてIRF群のユビキチン化が抑制されていた．Trim21-/-マウスのSLEモデルマウス（MRL/lpr）へのバックグラウンド転換は8世代の交配が終了しており，今後表現型解析を行う予定である．

Research Products

• [Presentation] The dysfunction of the E3 ubiquitin ligase TRIM21 in systemic lupus erythematosus. (2014)
  • Author(s): Reikou Kamiyama, Ryusuke Yoshimi, Toshinori Tsukahara, Atsuhisa Ueda, Mitsuhiro Takeno, Keiko Ozato, Yoshiaki Ishigatsubo
  • Organizer: The American Association of Immunologists 101st Annual Meeting
  • Place of Presentation: David L. Lawrence Convention Center (Pittsburgh, Pennsylvania, USA)
  • Year and Date: 20140502-20140506
• [Presentation] 全身性エリテマトーデスにおける自己抗原TRIM21の役割 (2014)
  • Author(s): 神山玲光, 吉見竜介, 國下洋輔, 岸本大河, 峯岸薫, 浜真麻, 桐野洋平, 浅見由希子, 上田敦久, 岳野光洋, 石ヶ坪良明
  • Organizer: 第58回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京）
  • Year and Date: 20140424-20140426
• [Presentation] Autoantigen TRIM21/Ro52 negatively regulates TRAF6 expression via TRIM21-p62-TRAF6 trimer formation. (2013)
  • Author(s): Ryusuke Yoshimi, Reikou Kamiyama, Toshinori Tsukahara, Kaoru Minegishi, Maasa Hama, Yohei Kirino, Yukiko Asami, Atsuhisa Ueda, Mitsuhiro Takeno, Herbert C. Morse III, Keiko Ozato, Yoshiaki Ishigatsubo
  • Organizer: 12th International Symposium on Sjogren’s Syndrome
  • Place of Presentation: Kyoto Hotel Okura (Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 20131009-20131012
• [Presentation] The E3 ubiquitin ligase TRIM21 promotes degradation of TRAF6 via TRIM21-p62-TRAF6 complex formation. (2013)
  • Author(s): Ryusuke Yoshimi, Toshinori Tsukahara, Reikou Watanabe, Maasa Hama, Atsushi Ihata, Atsuhisa Ueda, Mitsuhiro Takeno, Herbert C. Morse III, Keiko Ozato, Yoshiaki Ishigatsubo
  • Organizer: The Joint International Meeting of The 78thMeeting of The Japanese Society of Interferon and Cytokine Research and The 21st International Symposium on Molecular Cell Biology of Macrophages
  • Place of Presentation: Toshi Center Hotel (Tokyo, Japan)
  • Year and Date: 20130520-20130521
• [Presentation] The E3 ubiquitin ligase TRIM21 forms a complex with p62 and TRAF6 and promotes degradation of TRAF6. (2013)
  • Author(s): Ryusuke Yoshimi, Reikou Watanabe, Toshinori Tsukahara, Maasa Hama, Atsushi Ihata, Atsuhisa Ueda, Mitsuhiro Takeno, Herbert C. Morse III, Keiko Ozato, Yoshiaki Ishigatsubo
  • Organizer: The American Association of Immunologists 100th Annual Meeting
  • Place of Presentation: Hawaii Convention Center (Honolulu, Hawaii, USA)
  • Year and Date: 20130503-20130507