2012 Fiscal Year Research-status Report
アスペルギルス・バイオフィルムに対する宿主免疫応答メカニズムの解明
| Project/Area Number |
23791138
|
|---|
| Research Institution | Nagasaki University |
|---|
Principal Investigator |
今村 圭文 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (90467960)
|
|---|
| Keywords | 深在性真菌症 / アスペルギルス |
|---|
| Research Abstract |
Aspergillus fumigatus(AF)の細胞壁はβ-1,3-glucan，α-1,3-glucan，chitin，ガラクトマンナンなどで構成されており，バイオフィルム(BF)ではα-1,3-glucanが重要な要素の一つである．本年度はα-glucanase(AG)がAFの成長およびBF形成に与える影響、およびAFと宿主細胞の免疫応答に対する影響について解析した。
AF分生子を液体培地で振盪培養したところ，AG添加群で培養3時間後の分生子凝集及び24時間後の菌塊形成が抑制された．次に分生子を液体培地にて静置培養したところ，鏡検ではAG添加の有無で24時間後の菌糸成長に明らかな差はないものの，共焦点レーザー顕微鏡ではBFの厚さに差異を生じていた．またAG添加群では，気道上皮細胞H292への分生子接着が抑制されていた．AFのBFに対する抗真菌薬の薬剤感受性を，XTTを用いて測定したところ，AF B-5233株ではアムホテリシンB，ボリコナゾール，ミカファンギンにおいて，BF形成に伴う薬剤耐性化が確認された．AG単剤でMICへの影響はなく，また他の抗真菌薬との併用効果も認めなかった．
次に、ヒト単球THP-1細胞をAFで刺激したしたところ，IL-8，TNF-α等の炎症性サイトカインが誘導されていた。また、このサイトカイン産生は、AFが分生子から成長する過程で、菌糸が伸長する時期に最も多く産生されていることが分かった。さらに、AG添加によりこのサイトカイン誘導能が増強されていた．
以上の結果より、AGのAFに対する直接的な抗真菌活性は認めないものの，分生子の凝集および気道上皮細胞への接着が減弱しており，初期のBF形成を抑制する可能性が示唆された．またAG添加によりサイトカイン誘導能が増強されており，AGが宿主細胞のAF認識能を高めている可能性が示唆された．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定通り、アスペルギルスバイオフィルムと宿主免疫との相互反応について、昨年度よりも更に解析がすすんでいる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、当初の予定通りアスペルギルス･バイオフィルム阻害因子の検索や、慢性肺アスペルギルス感染動物モデルにおける治療効果について検討を行う予定である。
|
| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
当初の予定通り、試薬、実験消耗品、実験動物の購入費等や、関連学会への参加費に研究費を使用する予定である。
|
