ＲＡＳ／ＭＡＰＫ症候群における遺伝子発現・エピジェネティクス解析

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23791148
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 新堀 哲也 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40436134)
• Keywords: RAS/MAPK / Noonan症候群 / Costello症候群 / CFC症候群

Research Abstract

患者の検体を収集し、既知の原因遺伝子であるPTPN11、HRAS、KRAS、BRAF、MEK1/2、SOS1、RAF1、SHOC2のキャプラリーシークエンサーによる遺伝子解析を行った。これは、患者の臨床症状と遺伝子型の関連を明らかにする上で重要である。ヌーナン症候群および類縁疾患が疑われ、既知遺伝子に変異が同定されなかった14人について新規原因遺伝子同定を目的としてエクソーム解析を行った。その結果4人にRASサブファミリーに属するRIT1遺伝子にミスセンス変異を同定した。更に変異陰性患者166例でRIT1遺伝子を解析したところ、13例に変異を同定し、合計180例中17例（9％）に9種類のミスセンス変異を同定した。RIT1変異陽性患者の臨床症状はヌーナン症候群に合致しており、70％に肥大型心筋症を認めた。これはヌーナン症候群全体での肥大型心筋症合併率である20％と比べ高かった。患者で同定された5種類の変異体をNIH3T3細胞に発現させELK1転写活性をルシフェラーゼアッセイにて解析したところ、野生型と比較し上昇がみられた。また、ゼブラフィッシュ胚に変異mRNAを導入したところ、頭部の形態異常や心のルーピング異常、心腔の形成不全、卵黄嚢の形態異常がみられた。これらの結果により、RIT1の機能獲得型変異がヌーナン症候群を引き起こすことを示され、ヒト発生において古典型RASの変異と同様の機能を持つことが示唆された。

Research Products

• [Journal Article] TBX1 Mutation Identified by Exome Sequencing in a Japanese Family with 22q11.2 Deletion Syndrome-Like Craniofacial Features and Hypocalcemia. (2014)
  • Author(s): Ogata T, Niihori T, Tanaka N, Kawai M, Nagashima T, Funayama R, Nakayama K, Nakashima S, Kato F, Fukami M, Aoki Y, Matsubara Y.
  • Journal Title: PLoS One. Volume: 9(3) Pages: e91598
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0091598
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A girl with Cardio-facio-cutaneous syndrome complicated with status epilepticus and acute encephalopathy. (2014)
  • Author(s): Wakusawa K, Kobayashi S, Abe Y, Tanaka S, Endo W, Inui T, Iwaki M, Watanabe S, Togashi N, Nara T, Niihori T, Aoki Y, Haginoya K.
  • Journal Title: Brain Dev. Volume: 36(1) Pages: 61-63
  • DOI: 10.1016/j.braindev.2012.12.007
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Gain-of-function mutations in RIT1 cause Noonan syndrome, a RAS/MAPK pathway syndrome. (2013)
  • Author(s): Aoki Y, Niihori T, Banjo T, Okamoto N, Mizuno S, Kurosawa K, Ogata T, Takada F, Yano M, Ando T, Hoshika T, Barnett C, Ohashi H, Kawame H, Hasegawa T, Okutani T, Nagashima T, Hasegawa S, Funayama R, Nagashima T, Nakayama K, Inoue S, Watanabe Y, Ogura T, Matsubara Y.
  • Journal Title: Am J Hum Genet. Volume: 93(1) Pages: 173-180
  • DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.05.021
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Sequential analysis of amino acid substitutions with hepatitis B virus in association with nucleoside/nucleotide analog treatment detected by deep sequencing. (2013)
  • Author(s): Ninomiya M, Kondo Y, Niihori T, Nagashima T, Kogure T, Kakazu E, Kimura O, Aoki Y, Matsubara Y, Shimosegawa T.
  • Journal Title: Hepatol Res Volume: Epub ahead of print Pages: accepted
  • DOI: 10.1111/hepr.12168
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Exome sequencing identifies a novel TTN mutation in a family with hereditary myopathy with early respiratory failure. (2013)
  • Author(s): Izumi R, Niihori T, Aoki Y, Suzuki N, Kato M, Warita H, Takahashi T, Tateyama M, Nagashima T, Funayama R, Abe K, Nakayama K, Aoki M, Matsubara Y.
  • Journal Title: J Hum Genet. Volume: 58(5) Pages: 259-266
  • DOI: 10.1038/jhg.2013.9.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] エクソームシークエンスによるNoonan症候群新規原因遺伝子RIT1の同定 (2013)
  • Author(s): 新堀哲也、青木洋子、番匠俊博、岡本伸彦、 水野誠司、黒澤健司、緒方勤、高田史男、 長谷川奉延、舟山亮、長嶋剛史、中山啓子、 井上晋一、渡邊裕介、小椋利彦、松原洋一
  • Organizer: 日本人類遺伝学会第58回大会
  • Place of Presentation: 仙台市
  • Year and Date: 20131121-20131123
• [Presentation] 当分野におけるヌーナン症候群及び類縁疾患の遺伝子解析の現状 (2013)
  • Author(s): 新堀哲也、矢尾板全子、守谷充司、井泉瑠美子、大場大樹、西山亜由美、井上晋一、呉繁夫、 松原洋一、青木洋子
  • Organizer: 第216回日本小児科学会宮城地方会
  • Place of Presentation: 仙台市
  • Year and Date: 20131108-20131108
• [Presentation] Exome sequencing identifies mutations in RIT1 in patients with Noonan syndrome (2013)
  • Author(s): T Niihori, Y Aoki, T Banjo, N Okamoto, S Mizuno, K Kurosawa, T Ogata, F Takada, M Yano, T Ando, T Hoshika, C Barnett, , H Ohashi, H Kawame, T Hasegawa, T Okutani, T Nagashima, S Hasegawa, R Funayama, T Nagashima, K Nakayama, SI Inoue, Y Watanabe, T Ogura, Y Matsubara
  • Organizer: 米国人類遺伝学会2013
  • Place of Presentation: ボストン（米国）
  • Year and Date: 20131022-20131026