2012 Fiscal Year Research-status Report
III型ナトリウム－リン酸共輸送担体Ｐｉｔ－１のリン酸再吸収への関与
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23791216
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| Research Institution | Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health |
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Principal Investigator |
山崎 美和(若林美和) 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立母子保健総合医療センター(研究所), その他部局等, 研究員 (50455549)
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| Keywords | Pit-1 / リン / くる病 |
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| Research Abstract |
III型ナトリウム‐リン酸（Na+/Pi）共輸送担体であるPit-1/Slc20a1は、ユビキタスに発現しており、無機リン酸の細胞内への輸送に関わる共輸送担体であるが、その機能については不明な点が多い。研究者らは細胞外無機リン酸応答性の分子機序について解析を行い、Pit-1が細胞外無機リン酸応答性に関与すること、さらにリン酸利尿因子であるFGF23により惹起されるシグナルと細胞外無機リン酸シグナルが、PiT-1とFGF受容体（FGFR）を介して下流のシグナルを共有することを明らかにした(Yamazaki M. et al. J Cell Biochem, 2010, Kimata M. et al. Bone, 2010)。リン酸トランスポーターであるPit-1を介するシグナル伝達にリン酸の細胞内流入が必要であるのかという点や、FGFRとの間に介在する分子機序が興味の持たれるところであり、はじめにこの点について、野生型ヒトPiT-1発現ベクターを構築し解析を行った。ヒト胎児腎臓由来細胞株であるHEK293細胞を使用し、導入した野生型hPiT-1の発現を確認したところ、糖鎖付加などによる翻訳後修飾を受け、より成熟した分子として形質膜に発現していることが確認できた。また、RIを用いたPi uptake assayにより野生型hPiT-1が機能的に発現していることも確認した。さらに、リン輸送能を欠くPiT-1変異体hPiT-1[S128A] （Beck L, et al. J Biol Chem, 2010）発現プラスミドを構築し、Pi uptake assayによりhPiT-1[S128A]が予測通りリン酸輸送能を欠いていることを確認した。今後、リン酸輸送能を欠くこの変異体が細胞外無機リン酸シグナル応答性に与える影響について検討する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
III型Na+/Pi共輸送担体であるPit-1の機能について、野生型PiT-1およびリン酸輸送能を欠くPiT1変異体を使用した解析を進めているため。またマウスを使用したin vivoでの解析も予定しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、リン輸送能を欠くPiT-1変異体を使用し、細胞内へのリン輸送と細胞外無機リン酸シグナル応答性との関連について検討する予定である。また、マウスにリン酸利尿因子であるFGF23組換え蛋白を投与し、in vivoにおいてもFGF23と細胞外無機リン酸が、Pit-1とFGFRを介して下流のカスケードを共有する機構が存在するかどうかについても検証する。また、マウスを使用し、食事からのリンの影響による腎臓でのPit-1の発現および局在変化についても検討する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
産前産後の休暇および育児休業による研究中断：平成25年1月19日から平成26年3月31日
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[Journal Article] Sodium-coupled neutral amino acid transporter 4 functions as a regulator of protein synthesis during liver development.2013
Author(s)
Kondou H, Kawai M, Tachikawa K, Kimoto A, Yamagata M, Koinuma T, Yamazaki M, Nakayama M, Mushiake S, Ozono K, Michigami T.
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Journal Title
Hepatol Res
Volume: 43
Pages: 1211-23
DOI
Peer Reviewed
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