2013 Fiscal Year Research-status Report
臓器移植拒絶の制御をめざして：新規移植抗原識別受容体ＭＭＲの解析と阻害法の開発
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23791505
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
山路 純子 (田代 純子) 大阪医科大学, 医学部, 講師 (40340559)
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| Keywords | 移植・再生医療 / 免疫学 / 遺伝子 / 細胞・組織 / 生体分子 |
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| Research Abstract |
1.我々が単離したヒトMMR２は同種異系（アロ）MHCのHLA-B62(15)に特異的な結合を示す受容体であるが、平成２４年度に新たに２種類のリガンド候補HLAが同定された事から、これらの結合の強さや生体における役割を調べるため、ヒトMMR２タンパク又は末梢血単核球を用いてフローサイトメトリー法（大阪医科大学 研究機構 BD FACSAria）を解析した。結果、ヒトMMR２は、80種類のHLAタンパク（世界の人類をほぼ網羅）を用いた検討より、HLA-B62、HLA-B13、HLA-A32に対する特異的結合が示された。
2.MMRの生体における機能を知る為、MMR遺伝子をin vivoで欠損させた場合の移植免疫への影響や、生理的な役割を知ることを目的として、MMR２遺伝子破壊マウスを、C57BL/6近交系マウスとの１０世代の戻し交配により樹立した。平成２５年度の解析の結果、（１）MMR２KOマウスは胸腺、脾臓、腸間膜リンパ節、骨髄などの免疫組織の発達や、アロ・非アロの外来抗原に対する免疫反応(白血球混合試験、接触性皮膚炎反応)は、野生型と同程度で異常は見られなかった。（２）しかしながら、皮膚移植の結果（研究協力者：前田 省吾（本学 形成外科学）と実施）、MMR２KOマウスは野生型と異なり、MMR1・2のリガンドのアロMHC class Iを強制発現させたマウスの皮膚を拒絶出来なかった。以上の結果より、MMR分子（単球やマクロファージ）は、皮膚のアロ移植片の拒絶に重要である事が示唆された。これらの成果は英論文として学術雑誌に掲載された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
平成２5年度の計画内のヒトやマウスのMMRの解析に関する計画の解析において、遅延が生じている。MMRの制御を確立する上で、MMRの生体における発現動態を知る必要があり、マウス（近交系、遺伝子改変マウスなど）やヒトの細胞から検討を進める予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の研究の推進方策として、以下に変更後の平成２６年度の実験計画（昨年度の遅延した計画を含む）を示す。
ヒトやマウスのMMRの解析に関する計画：（１）MMRの生体における発現動態の解析：生体におけるMMRの役割を検討するため、マウス（近交系、遺伝子改変マウス）の組織や培養細胞やヒトの培養細胞を用いてMMRの発現動態をRT-PCR法、フローサイトメトリー法を用いて解析する。（２）遺伝子改変マウスの表現型解析：MMR発現とマウス生体の各部位において野生型マウスと比較検討する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度使用額の114,461円が生じた理由は、平成２５年度に予定をしていた「ヒトやマウスのMMR1・MMR2の性質の解析に関する計画」の解析の検討において若干遅延が生じたため。
次年度使用額の114,461円については平成２６年度の研究計画に組み込まれた実験系（１）（推進方策欄）に使用を予定している。また、平成２６年度研究費の使用予定額については、実験系（１）・（２）（推進方策欄）の計画に対して次の通りに予定しており、内訳は、物品費として600,000円（細胞生物学実験の試薬消耗品・器具類・研究関連消耗品に100,000円、分子生物学実験の試薬消耗品・器具類・研究関連消耗品に450,000円、実験動物やその関連消耗品等に50,000円）、学会旅費として150,000円、その他（印刷費・研究成果投稿料等）として50,000円を予定している。
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