2012 Fiscal Year Annual Research Report
リン酸化サイクルを介したオートファゴソーム形成機構の解明
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23890059
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
荒木 保弘 東京工業大学, フロンティア研究機構, 助教 (60345254)
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| Project Period (FY) |
2011-08-24 – 2013-03-31
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| Keywords | オートファジー / PI3キナーゼ / Vps34 / Atg14 |
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| Research Abstract |
オートファジーは、タンパク質等の細胞質成分のみならず、オルガネラのような巨大な構造体を丸ごと分解する、真核生物に広く保存されたバルク分解システムである。
Vps34は生体膜リン脂質の一種、ホスファチジルイノシトール3リン酸(PI3P)を産出するPI3キナーゼである。 Vps34は、オートファジーに寄与するcomplex I（Vps15、Vps34、Atg6、Atg14）と、液胞酵素の輸送に寄与するcomplex II（Vps15、Vps34、Atg6、Vps38）の二つの複合体として存在する。しかし、両複合体が異なる機能を発揮する分子機構は不明であり、構成因子のより詳細な解析は必須である。
オートファゴソーム形成過程において最も初期に必要であるAtg1キナーゼの基質を探索する過程において、質量分析解析によりp25をVps34と免疫沈降で共沈される因子として同定した。このタンパク質はcomplex Iと共沈されるが、complex II特異的因子Vps38とは結合しないこと、飢餓に応答して、オートファゴソーム形成の場であるPASに局在することから、p25はcomplex I特異的構成因子であることが明らかとなった。p25欠失株ではオートファジー活性が低下し、複合体がAtg14/Atg6とVps34/Vps15の二つのサブコンプレックスに解離した。p25はAtg14とVps34/Vps15の両者にそのN末側領域を介して相互作用する。更なる生化学的解析により p25はC末側領域でホモ２量体化すること、この２量体がcomplex I形成に必須であることが判明した。これらの結果はp25の２量体がAtg14/Atg6とVps34/Vps15の間を繋ぎ止める役割を果たしていることを示唆する。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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