2023 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of the mechanism of fat accumulation in fish
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23K05387
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| Research Institution | Niigata University of Pharmacy and Medical and Life Sciences |
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Principal Investigator |
千葉 映奈 新潟薬科大学, 医療技術学部, 講師 (80609660)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山下 菊治 新潟薬科大学, 医療技術学部, 教授 (30182497)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | 脂肪蓄積メカニズム / 養殖技術 / メダカ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、メダカを用いて、魚体における分子レベルでの脂肪蓄積メカニズムを解明することである。このメカニズムが明らかになれば、養殖魚の品質を決める要素として重要な「脂の乗り」のコントロールを可能にする養殖技術の発展に貢献できると考えられる。
この目的を達成するため、本年度の研究では魚類の内臓脂肪細胞、皮下脂肪細胞、筋組織において脂肪が蓄積されるとき、それぞれで遺伝子発現にどのような変化があるのか明らかにすることを目指した。方法は、まず、メダカに脂肪蓄積を起こさせるため、高脂肪食を摂取させた。この高脂肪食摂取メダカと、普通食を摂取させたメダカ（コントロール）の脂肪蓄積を肉眼的、組織学的観察によって調べた。その結果、高脂肪食摂取メダカでは内臓脂肪、皮下脂肪が増加していることがわかった。また、高脂肪食摂取メダカでは、多くの筋細胞の細胞内において脂肪滴が見られた。また、筋組織全体を観察すると、筋細胞の間に結合組織や脂肪細胞がコントロールと比較して増加していた。次に、コントロールと高脂肪食摂取メダカについて、内臓脂肪細胞、皮下脂肪細胞、筋における脂肪蓄積関連遺伝子の発現量を調べるためRT-qPCRを行った。
また、筋脂肪蓄積には「筋細胞内脂肪蓄積」と「筋線維間脂肪細胞による脂肪蓄積」があり、哺乳類における筋線維間脂肪細胞は、骨格筋間にあるPDGFRα発現間葉系前駆細胞が分化することで出現することがわかっている。よって、魚類でも哺乳類と同様の機序が働いているのか明らかにするため、まずPDGFRα発現間葉系前駆細胞の存在の確認を目的とし、免疫染色を行った。その結果、陽性細胞は見られなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
従来のプロトコルでRT-qPCRを行ったところ正常な増幅曲線が得られず、実験条件の見直しを行っていたため当初の計画より遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
RT-qPCRについては実験条件を確立し、コントロールと高脂肪食摂取メダカの内臓脂肪細胞、皮下脂肪細胞、筋における脂肪蓄積関連遺伝子の発現量をとらえる。そして、それぞれの細胞での遺伝子発現にどのような特徴があるか明らかにする。PDGFRα発現間葉系前駆細胞については、抗体の交差性の問題も考えられるため、他の方法での確認を行うことを検討している。
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| Causes of Carryover |
本年度の研究が予定より遅れたため次年度使用額が生じた。この次年度使用額は、遅れている実験を進めるために必要な試薬や消耗品の購入に充てる。
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