Functional analysis focusing on phosphorylation of autism-related gene NLGN3

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K07029
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 井桁 裕文 新潟大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (10751026)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 江川 純 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (80648527)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Keywords: 自閉スペクトラム症 / NLGN3 / ハイコンテントスクリーニング / リン酸化

Outline of Annual Research Achievements

成長円錐のリン酸化プロテオミクスにより同定された神経発達に重要なタンパクリン酸化部位のうち、統合失調症および自閉スペクトラム症（Autism Spectrum Disorder; ASD）のリスク遺伝子であるNLGN3遺伝子を選定して機能解析を進めている。
ASD304例のDNAサンプルについてNLGN3の全エクソンシークエンスを行ったがミスセンス変異を同定することはできなかった。
そのため神経細胞成長円錐のリン酸化プロテオミクスにより重要なリン酸化部位として同定されたNLGN3遺伝子のS745Aの変異を加えた培養神経細胞のシナプス数の変化を確認するために、同変異を導入したプラスミドベクターの設計を行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

予定通りASD304例のDNAサンプルについてNLGN3の全エクソンシークエンスを終了したため。

Strategy for Future Research Activity

NLGN3遺伝子のS745Aの変異を加えた培養神経細胞のシナプス数の変化を確認するために、同変異を導入したプラスミドベクターを作成し、培養神経細胞にこの変異を導入する。そして、ハイコンテントスクリーニングを用いて、神経突起伸長およびシナプス数の変化を確認する。

Causes of Carryover

能登半島地震の影響で細胞形態計測に使用する自動細胞解析装置に不測の故障が生じたため、次年度に実験試薬を発注する必要が生じた。