2023 Fiscal Year Research-status Report
Analyzing and overcoming chemoradiation resistance mechanism for esophageal squamous cell carcinoma through miRNA functional analysis
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23K07378
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
大沼 啓之 札幌医科大学, 医学部, 講師 (60582997)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保 智洋 札幌医科大学, 医学部, 助教 (00634669)
高田 弘一 札幌医科大学, 医学部, 講師 (90398321)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | 食道癌 / 化学放射線療法 / 効果予測因子 / miRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
進行食道扁平上皮癌に対する化学放射線療法(CRT)は食道温存が可能な有望な治療法である.CRT著効例では手術に劣らない成績が示されている一方で一定の割合で早期・晩期有害事象がみられ，治療前にその効果を予測することは重要だがいまだ臨床応用された効果予測マーカーはない.申請者らは以前，治療前癌組織の網羅的miRNA発現解析により，CRT感受性マーカーの候補としてmiR-625-3pを見出し，さらに前向きデータセットによる治療前血清とFFPEブロックの解析から，CRT感受性群でのmiR-625-3p発現亢進と血漿・組織間の発現量に正の相関を認めることを明らかにした.
本研究では，同miRNAの標的遺伝子であるMEKK1-JNK経路を介した抗癌剤耐性および放射線 耐性獲得の機序を明らかとすることを目的とした．
本年度では，ESCC細胞株TE-1，TE-5に対し，miR-625-3p mimicとinhibitorを導入し，5-FU, nedaplatin, docetaxelで添加・培養，放射線感受性については細胞放射線照射器M100Wにて照射を行ない，MTT assayにて増殖抑制効果を検討したところ，miR-625-3p導入株においてdocetaxel，放射線に対する増殖抑制効果が認められた．次いでmiR-625-3pによりMEKK1の発現が制御されているかを確認すべく前述のmiR-625-3p mimic/inhibitor導入細胞株を用い，MEKK1発現をqRT-PCRおよびwestern blottingにて検討したところ，miR-625-3pとMEKK1発現に負の相関を認めた．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
miRNA作成に時間を要したため．
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度に使用予定の抗体，試薬，細胞株等は概ね確保しており，計画に変更はない.
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| Causes of Carryover |
(理由)多くの実験で使用予定だったmiRNA mimic1およびinhibitorの作成が遅れたために本年度実施予定の一部実験に遅れが生じた.
(使用計画)このため，残りの同解析を次年度に行うこととし，未使用額はその経費に充てることとしたい.
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