可溶性エポキシドヒドロラーゼ阻害ワクチンによる脳梗塞治療の開発

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K08502
• Research Institution: Saga University
• Principal Investigator: 増岡 淳 佐賀大学, 医学部, 准教授 (50359949)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 阿部 竜也 佐賀大学, 医学部, 教授 (40281216) ; 白木 綾 佐賀大学, 医学部, 特任教授 (50638252) ; 古川 隆 佐賀大学, 医学部, 助教 (60869832)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Keywords: エポキシドヒドロラーゼ阻害ワクチン / 脳梗塞治療

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、抗炎症作用・抗血栓作用を有するEET（エポキシエイコサトリエン酸）を分解する酵素である可溶性エポキシドヒドロラーゼ（soluble epoxide hydrolase: sEH）に対するワクチンを作成し、それを投与することにより、血中のEET濃度が高まり、抗炎症作用、血管拡張作用、血栓抑制作用、血小板凝集抑制作用、血管新生作用などの多面的な効果により、脳梗塞の範囲を縮小できる可能性を期待して、抗sEHワクチンの脳梗塞治療への応用を目指している。
令和5年度は、スタッフの異動や他の業務の兼ね合いにより、人員配置の見直しを行ったうえで、本実験に必要な各ステップにおけるプロトコール作りと手技の習得にあてた。具体的には、１）動物モデルの必要数を算出、２）抗sEHワクチンの至適投与量を設定、３）モデル動物内で産生される抗sEH抗体価を測定するにあたり、尾静脈採血の手技を習得、またELISAプロトコールを作成し、その手技を習得、４）安定した一過性中大脳動脈閉塞モデルを作成するために、麻酔をかけてから中大脳動脈を閉塞し再灌流するまでの一連の手技を確認し、一部を改良、５）モデル動物に脳梗塞が形成された後の神経機能評価法、６）全脳摘出し、大脳を裁断して切片を作成、７）脳梗塞の染色とその体積の算出法、８）免疫染色およびウエスタンブロッティング法の検討対象とする蛋白質のしぼり込み、同方法の各ステップでの操作手順の確認、９）本実験を通しての必要器具数の算出、試薬の調達準備を行った。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

スタッフの異動や他の業務の兼ね合いにより、当初の予定通りには準備が進まなかったため、進捗状況がやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

令和6年度は、段階的にサンプル数を増やして、コントロール群と抗sEH抗体投与群とで、脳梗塞の体積を比較し、抗sEHワクチンの脳梗塞縮小効果を検証する。

Causes of Carryover

多数例での動物実験は行えなかったので、研究補助および資料整理の業務は代表研究者自身が行った。今後、サンプル数を増やして研究を遂行し、その結果を国内外の学会で発表する予定である。