2023 Fiscal Year Research-status Report
Arthroprotective effects of the transcription factor Hif-2alpha in cartilage and synovium.
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23K08649
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
河野 賢一 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50898286)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 琢 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (30456107)
岩永 康秀 東京大学, 大学院工学系研究科(工学部), 特任助教 (80906610)
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Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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Keywords | Hif-2α / Prg4 |
Outline of Annual Research Achievements |
In vivo実験では動物実験に使用するPrg4-CreERT2 ;Hif-2αfl/fl マウスを作成し、コントロール群をPrg4-CreERT2 としaging modelとして3サンプルずつそろえた。骨成熟した12週でタモキシフェンを腹腔内投与し、投与後1年で組織学的評価をお行うべく飼育している。組織学評価を行うにあたりサンプルの脱灰条件、免疫染色に使用するHif-2α抗体の条件検討は完了した。またPrg4-CreERT2 ;Hif-2αfl/fl マウスに12週でタモキシフェンを投与後1週でDMMモデルを作成し、術後8週で膝サンプルを回収し組織学的評価を行っている。またcell tracking解析のためPrg4-CreERT2 ;Ai14マウスを交配している。In vivo実験では生後5日のPrg4-CreERT2 ;Hif-2αfl/fl マウスの膝軟骨からSFZ細胞の初代培養を当研究室で行われているプロトコールに基づいて行い、RT-PCRでSFZ細胞を分離できていることを確認できた。SFZ細胞に水溶性タモキシフェンを投与しRT-PCRでPrg4の発現が低下することを確認した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実験マウスの量産体制が確立し、In vivo実験におけるaging modelマウスが早期にそろったため。In vitro実験におけるSFZ細胞手技を確立したため。
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Strategy for Future Research Activity |
In vivo実験を行うためのサンプルはそろったため今後組織学的解析、遺伝子発現解析並びに細胞トラッキング実験を進めていく。In vitro実験ではSFZ細胞の分離を行うことができたため、今後RNAシークエンスを行い遺伝子発現解析を行っていく。
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Causes of Carryover |
次年度使用額が生じた理由:順調に研究が進んでいるため、必要以上に経費をかけずに済んだ。 次年度使用計画:次年度以降の経費のかさむ実験・解析に使用する計画である。
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Research Products
(1 results)