2023 Fiscal Year Research-status Report
Effects of three subtypes of Mfa1 fimbriae on epithelial-mesenchymal transition in periodontal tissue destruction.
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23K09177
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| Research Institution | Aichi Gakuin University |
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Principal Investigator |
菊池 毅 愛知学院大学, 歯学部, 准教授 (40421242)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三谷 章雄 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (50329611)
長谷川 義明 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (70460524)
藤田 剛 愛知学院大学, 歯学部, 歯学部研究員 (80379883)
後藤 久嗣 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (10783037)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | 歯周病 / P. gingivalis / Mfa1線毛 / 上皮間葉転換 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周病のキーストーン病原体として認知されているPorphyromonas gingivalisが持つ線毛は、歯周組織への定着のみならず歯周組織破壊におい ても重要な役割を担っている。二種類ある線毛のうち、Mfa1線毛に関する研究、特に組織破壊に与える直接的影響に関する報告は僅かである。今回、歯周組織破壊における3つのサブタイプのMfa1線毛の役割を明らかにすることを目的とし、in vivo研究として線毛発現の異なったP. gingivalis誘導実験的歯周炎における上皮組織の変化に関して免疫・組織学的に比較検討することとした。in vitro研究としてMfa1線毛の歯肉上皮細胞に対する上皮間葉転換(EMT)に及ぼす影響を検討することとした。各種 P. gingivitis線毛の精製をイオン交換カラムに使用し精製した。次にヒト歯肉上皮細胞株のCa9-22細胞を各種精製線毛と共に培養後、total RNAを抽出し、qPCR 法を用いて、EMTに関連するE-cadherin、N-cadherin、Claudins、Vimentin、Integrin α6、Integrin α5、IL-6、TGF-β等の遺伝子発現の定量を行った。Mfa1線毛の刺激により、E-cadherin、Claudins、TGF-βの遺伝子発現が、有意に減少していた。その他のEMT関連遺伝子に関しては、有意な変化を認めなかった。今後は、細胞株を使用したMfa1線毛によるEMT関連因子の発現調節に関する詳細な解析を行う。また、マウスに線毛発現の異なったP.gingivalis株を経口感染させ実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の特に上皮組織に着目し、組織学的・形態学的な解析および歯肉組織から遺伝子を抽出し、EMTに関連する因子のPCR Array、遺伝子発現の解析、タンパク産生の検討を行う予定とする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
動物実験を用いたMfa1線毛の歯周組織破壊に与える影響について解析が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
マウス結紮実験的歯周炎モデルを元に、線毛発現の異なるP.gingivalisを経口投与し、歯周組織破壊に対する影響を、上皮間葉転換に着目して、詳細に解析を行うことで、Mfa1線毛の歯周組織破壊に与える影響を解明したい。
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| Causes of Carryover |
細胞培養実験に関して、既に持ち合わせていた試薬を併せて使用していたため、次年度使用額が生じた。次年度は、動物実験で新たな試薬を購入する等の研究経費を必要とするため、次年度使用額を使用する。
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[Presentation] The Involvement of ANGPTL4 in Periodontitis and the Influence of High Glucose2023
Author(s)
S Kondo, K Kojima, N Nakamura, M Miyabe, T Kikuchi, T Ohno, N Sawada, T Minato, T Saiki, M Ito, S Sasasima, T Matsubara, A Mitani, K Naruse
Organizer
American Diabetes Association 83th SCIENTIFIC SESSIONS
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