Induction of salivary gland organoids and establishment of a regeneration model by applying salivary gland primordium

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K09408
• Research Institution: Fukuoka Dental College
• Principal Investigator: 平木 昭光 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 教授 (60404034)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉本 尚平 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 講師 (70780188)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Keywords: 唾液腺 / 再生 / 分化

Outline of Annual Research Achievements

本研究はマウス胎仔唾液腺原基から唾液腺幹細胞を樹立し、オルガノイドの誘導と生体への移植法を確立して、唾液腺再生法の構築を目指すものである。
2023年度は唾液腺幹細胞の分離・培養を行った。妊娠マウス（C57BL/6J）から胎齢14日マウス胎仔を摘出後、顎下腺原基を採取し、EGFとFGF10を添加したDMEM/F12培地を用いて器官培養を行った。その顎下腺原基周囲からプラスチックディッシュ上に増殖した細胞（以下分離幹細胞）を採取した。
分離幹細胞群はほぼすべての細胞がPan-CKに陽性を示した。基底細胞のマーカーであるp63に陽性を示す細胞が多数認められ、腺房細胞のマーカーであるAQP5、アミラーゼは陰性、筋上非細胞のマーカーであるαSMAに対しては少数の陽性細胞が認められた。
これらの結果から、分離幹細胞群は一部が筋上皮細胞に分化したものもあるが、導管上皮の基底細胞を多く含んでおり唾液腺幹細胞の性質も持っている可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

2023年度の研究実施計画は予定通り遂行中である。現在のところ、予期せぬ事で計画通りに進まないことはなく、当初から予定しているように計画を遂行する予定である。

Strategy for Future Research Activity

分離幹細胞周囲の間葉組織の役割に着目し、予備実験にて唾液腺幹細胞と共培養した周囲間葉組織と、共培養していない周囲間葉組織をDNAマイクロアレイ解析にて比較したところ、Galanin（共培養により18倍に増加）、 R-spondin3（共培養により2.4倍に増加）の発現に差異が認められた。今後その再現性の確認実験を行う予定である。また、それらの実験で抽出された因子は唾液腺分化誘導において重要な役割をなす可能性があり、新たな刺激因子として分化誘導の実験を計画している。

Causes of Carryover

抗体や成長因子の試薬が納期に間に合わなかったため、次年度使用額が生じた。
次年度の研究計画において使用する予定である。