分子動力学シミュレーションによるRNA-タンパク質相互作用を阻害する化合物の探索

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K14384
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 大曽根 達則 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (10962243)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2026-03-31
• Keywords: lncRNA / RNA-タンパク質相互作用

Outline of Annual Research Achievements

当初は、本研究目的である「RPI阻害剤候補探索のための手法開発」を実現するために分子動力学シミュレーションによってタンパク質が最も結合しやすい核酸配列を予測できるか検証する予定であった。それが上手くいかなかった場合の代替案として、PDBから得たタンパク質と結合するRNA配列を使用する予定であった。しかしながら、実際には標的としたいRNAがすでに決まっている場合が多いと考え、bulkRNASeqで得られた長鎖非翻訳性RNAをRNA-タンパク質相互作用の対象候補とすることにした。候補となる長鎖非翻訳性RNAを差次的発現変動遺伝子解析によって抽出し、候補長鎖非翻訳性RNAと相互作用すると予想されるタンパク質候補をlinc2functionを用いて予測した。予測されたタンパク質をGeneOntology解析した結果、RNAスプライシングに関係するタンパク質であった。そのため、長鎖非翻訳性RNAがDNAと三重鎖を形成しうるかを予測した。形成すると予測されなかったlncRNAはDNAではなくRNAと相互作用するものと考えられるため、形成すると予測されなかったlncRNAを最終候補とした。
最終候補のlncRNAに対して3次元構造予測した。また、それらと相互作用すると考えられるタンパク質の構造も予測した。
本研究の目的は分子動力学シミュレーションによってRNA-タンパク質相互作用の阻害剤を探索することであるため、分子動力学シミュレーションを実行する環境の構築も行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初は、本研究目的である「RPI阻害剤候補探索のための手法開発」を実現するために分子動力学シミュレーションによってタンパク質が最も結合しやすい核酸配列を予測できるか検証する予定であった。
それが上手くいかなかった場合の代替案として、PDBから得たタンパク質と結合するRNA配列を使用する予定であった。
しかし、実際にはbulkRNA-SeqからRNA-タンパク質相互作用の対象となるlncRNAを選定しRNA-タンパク質相互作用を予測するツールを用いて当lncRNAに結合するタンパク質の予測を行った。
進捗としてはlncRNAおよびタンパク質の構造予測が完了し、分子動力学シミュレーションを実行するための環境構築も完了しているため、概ね順調とした。

Strategy for Future Research Activity

予測されたlncRNA-タンパク質複合体に対して分子動力学シミュレーションを行い、実際に複合体を予測通りに作りうるのかを検証する。
その後、化合物ライブラリ内の各化合物を加えた時のRNA-タンパク質相互作用の阻害能を測定する。

Causes of Carryover

進捗状況に記したように、RNA-タンパク質相互作用を予測するのに分子動力学シミュレーションを使わなかったため、HPCの使用量が抑えられたため。
次年度使用額分は、シミュレーションで使用する予定だった化合物数を増やすことでより多くの薬剤候補で実験するのに用いる。