2023 Fiscal Year Research-status Report
KRASG12C阻害薬により誘導されるadaptive resistanceの解明
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23K14639
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| Research Institution | Aichi Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
足立 雄太 愛知県がんセンター(研究所), がん標的治療TR分野, 研修生 (30833842)
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| Project Period (FY) |
2023-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | KRAS |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Hippo経路はMST、LATSの２つのキナーゼが転写共役因子であるYAPもしくはそのパラログであるTAZを負に制御するシグナル伝達経路である。すなわちKRASG12C阻害薬曝露後のYAP活性化の誘導メカニズムとしてHippo経路の活性化低下の挙動が重要な因子であり、YAPに加えてLATS及びMST のリン酸化の挙動をWestern blotを用いて解析した。その結果、LATS,MSTともにKRAS阻害薬投与後にリン酸化が低下していた。さらに上流制御因子の解析を進めた結果、膜タンパクであるScribbleがHippo-YAPシグナル伝達経路に関与していることを同定した。ScribbleはYAPを細胞質に保持し、KRAS阻害薬投与により、Scribbleが膜から離れると、YAPもフリーの状態となり、核移行することを、免疫染色およびウエスタンブロッティング法により明らかにした。さらに、YAPの下流分子として、RASスーパーファミリーのひとつであるMRASを同定した。MRASはTEAD/YAPによって直接制御されており、MRASの発現誘導により、MAPKが再活性化することが明らかとなった。MRASのノックアウトはKRAS阻害薬の効果を増強することをin vitro, in vivoで示すことができた。さらに、YAPの下流シグナルの分子として複数の標的を同定しており、今後順次評価を行っていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
YAPの制御について膜タンパクであるScribbleが関与することを示すことができた。下流についても候補分子を同定している。
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| Strategy for Future Research Activity |
YAPの下流の標的分子について、Chip assayを行い、YAPによる制御を確認する。また同定した分子の表現型を明らかにするために、CRISPR-Cas9によるノックアウトを行い、in vitroにおける細胞増殖アッセイやin vivo マウス皮下腫瘍モデルを用いてKRASG12C阻害薬のadaptive resistanceを克服できるかどうかを検討する。現在のところ解析はKRASG12C変異肺癌細胞株を用いて行うが、より生体に近い系での評価を可能とするために患者由来KRASG1 2C変異肺癌オルガノイドについても作成を試み、同表現型が得られるかどうかを解析する。
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| Causes of Carryover |
予定していた実験に遅れが生じたため、次年度に使用することにした。
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[Journal Article] SHP2 inhibitors maintain TGFβ signalling through SMURF2 inhibition2023
Author(s)
Lai Xianning、Lui Sarah Kit Leng、Lam Hiu Yan、Adachi Yuta、Sim Wen Jing、Vasilevski Natali、Armstrong Nicola J.、Bridgeman Stephanie Claire、Main Nathan Michael、Tan Tuan Zea、Tirnitz-Parker Janina E. E.、Thiery Jean Paul、Ebi Hiromichi、Kumar Alan Prem、Eichhorn Pieter Johan Adam
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Journal Title
npj Precision Oncology
Volume: 7
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
