Development of noninvasive biomarkers for rejection after renal transplantation focusing on heat shock protein and modified RNA

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K15437
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 前鼻 健志 札幌医科大学, 医学部, 助教 (30718002)
• Project Period (FY): 2023-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: Heat shock protein 90 / 腎移植 / 拒絶反応

Outline of Annual Research Achievements

前向きに腎移植患者症例の血清、尿検体の採取を行い98症例、血清・尿それぞれ230検体を確保し、それぞれの検体採取時の臨床状況について、血清クレアチニン値の上昇の有無やBanff分類に基づいた生検結果を含め情報を収集した。また、血清・尿の熱ショック蛋白（Heat shock protein90:HSP90）濃度測定はELISA法を用いて開始している。検体採取は多施設共同研究で行なっており、現在は自院検体のみHSP90濃度測定を開始している。今後他院で採取した検体の処理も行う予定である。当院では急性拒絶反応を示した症例が1例のみであり、現時点では拒絶反応のマーカーとしての有用性の評価は行うことができていないが、拒絶反応を認めなかった群ではHSP90濃度は低値を示す傾向が認められている。他院の症例ではのべ7検体で急性拒絶反応を示しており、その検討を行うことでHSP90のマーカーとしての有用性の評価を行うことが可能であると思われる。今後、他院検体での測定を行ったのちに臨床データとの相関を確認し、拒絶反応のマーカーとしての有用性の評価を進めていく。また、急性拒絶反応以外にも慢性抗体型拒絶反応症例、カルシニューリン阻害薬による腎毒性症例、BKウイルス腎症症例などの評価に用いることが可能か臨床データと比較・検討していくことを予定している。
血中のRNA抽出については研究協力者の施設で実際に行われている方法を確認した上で、研究協力者の助言・指導のもと抽出方法を確立し、血清を用いたRNA抽出を開始した。こちらもHSP90濃度測定と同様にまず自院症例での抽出を行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

症例・検体の収集は順調に行うことができている。また、血中・尿中HSP90濃度測定やRNA抽出を徐々に行なっておりデータは集積されてきている。自院症例での急性拒絶反応が少なく、血中・尿中HSP90濃度がマーカーとして有用かの評価を行うことができていないが、HSP90濃度測定、RNA抽出ともに測定・抽出方法を確立することができており、今後順調にデータを収集することができると考えている。

Strategy for Future Research Activity

検体の収集は順調に行うことができており、このまま継続する。HSP90濃度測定やRNA抽出については測定・抽出方法を確立できたため速やかにデータの集積を行なっていく。今後抽出したRNAに含まれる修飾RNA量を測定し検討を行なっていく。

Causes of Carryover

症例・検体の収集は計画通りに行っているが、使用キットの納期が長かった事や急な人員削減による研究エフォートの低下によって血中・尿中HSP90濃度測定やRNA抽出方法の確立に時間がかり、データの集積に少し遅れが生じている。
自院症例での急性拒絶反応が少なく、血中・尿中HSP90濃度がマーカーとして有用かの評価を行うことができていないが、研究を遂行するための実験手法が確立されたことから、増加しつつある収集検体からデータを収集するための試薬消耗品に使用する予定である。