2023 Fiscal Year Research-status Report
住血吸虫症の感染制御を目指した複数抗原型免疫の確立と横断的抗原探索
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23K19625
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
三須 政康 奈良県立医科大学, 医学部, 研究助教 (40983664)
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| Project Period (FY) |
2023-08-31 – 2025-03-31
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| Keywords | 住血吸虫症 / マンソン住血吸虫 / 組換えウイルス / ワクシニアウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
住血吸虫症は、WHOが提唱する顧みられない熱帯病（NTDs）の１つであり、発展途上国を中心に2億人を超える罹患者が存在する。特効薬としてプラジカンテルが用いられるようになったが、ヒト以外の哺乳類も終宿主（人獣共通感染症）とすることから防圧が非常に困難な疾患である。本研究では住血吸虫（Schistosoma mansoni）抗原を強制発現させた組換えワクシニアウイルスLC16m8株を樹立し、高い感染制御能を有する抗原をスクリーニング可能な系の構築を目指した。
高度弱毒化天然痘ワクチンLC16ｍ8株のゲノムを保持するbacterial artificial chromosome（m8-BAC）システムを用いて組換えウイルスを作製した。ｍ8-BACに挿入する抗原遺伝子は既報（Al-Naseri et al., 2021）を参考に、住血吸虫の代謝や免疫回避機構に関わるSm-TSP-2、Sm14、Sm-p80等を選定した。住血吸虫からRNAを抽出後、目的候補遺伝子のcDNAの調製に成功した。さらに、タンパク質精製を可能にするHisタグ配列を付加したサブクローニングにも成功した。今後は、これらの目的候補遺伝子を用いて組換えウイルスの作製を試みる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
組換えワクシニアウイルスの作製にあたり、学内外の各種承認を必要とし、審査に時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度（令和6年度）は住血吸虫に対する抗原を強制発現させた組換えウイルス（m8-Sm）を調製し、目的抗原タンパク質の発現確認を行う。更に、動物実験により抗体産生能の評価を行うため、マウスへのm8-Sm接種を実施する。マウス血清を回収することで（接種前、1回・2回接種後）、抗体価を分析する。また、液性免疫および細胞性免疫に対する誘導能を各種サイトカインELISA解析やフローサイトメトリーによる表面抗原発現解析、遺伝子発現解析を用いて多角的に評価する。
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