ALDH2変異型保有者の飲酒によるビタミンB6低下を介した血清ALT低下の検証

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 23K19834
• Research Institution: Saga University
• Principal Investigator: 高木 佑介 佐賀大学, 医学部, 客員研究員 (30985536)
• Project Period (FY): 2023-08-31 – 2025-03-31
• Keywords: ALDH2 / ALT / ビタミンB6 / PLP

Outline of Annual Research Achievements

Aldh2KO(Aldh2-/-)マウス（以下：すべて♂のみ）がエタノールを摂取した場合に、水を摂取した群（5検体）よりもビタミンB6（PLP）が有意差をもって低下することを5検体で確認した。また、対照群として、Aldh2+/+マウスで水摂取群7検体、エタノール摂取群7検体についても同様に確認し、こちらはエタノール摂取群で水摂取群に比べPLPが低下することがないことを確認している。
また、ALT上昇を確認するためのビタミンB6（PLP）添加量はALT等の国際的な検査法であるIFCC法に準じて0.1mmol/lを想定しているが、その添加量がマウス検体でも妥当か確認する必要がある。しかし、上記検体の測定において、Aldh2KOマウスのPLP低下は有意差をもってはいたものの、若干PLPの数値がばらついており、PLP添加量の確度を上げるため、現在の1.5～2倍程度まで検体数を増やしてPLPの添加量を検討する予定にしており、まだ、検体を集めている段階である。
並行して、本研究の予備研究である佐賀J-MICC studyを用いたヒトでの検討について論文執筆中である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

予備研究を詳細に検討している段階で、本研究に影響をきたす部分ではないが、新たな発見があり、想定していたよりも予備研究の論文執筆に時間を要している。
また、本研究で必要としているマウスは、別の実験でも使用されているため、必要検体数の達成に手間取っている。

Strategy for Future Research Activity

予備研究に関する論文執筆を１～２か月以内に完了させる必要がある。
検体数は概ね揃いつつあるので、予備研究に関する論文執筆が完了すれば、本研究におけるマウスのビタミンB6の解析に着手できる。既に一部完了しているため、単純にn数を増やして解析するだけであり、こちらは比較的容易である。そのビタミンB6濃度を参考に、PLPの添加量を決定し、ALTの測定に臨み、概ね残り半年間で論文まで記載する。
ただし、工程が遅れている分で、①想定している結果、すなわちエタノール摂取をさせたAldh2KOマウスの血清にPLPを添加しても、ALT低下が改善しない場合の追加実験が必要になった場合は進捗がさらに遅れる可能性がある。
また、マウスから採取した血清量及びALT測定に要する血清量を考慮すると、PLPの添加量は２つの濃度で実施するのが限界であり、PLPの添加量の設定が誤っていた場合、最初の検体集めから再度行うことになり、多大な時間を要してしまうことになるため、PLPの添加量を決める段階では慎重に検討する必要がある。

Causes of Carryover

動物実験の遅れにより、HPLCによる分析に係る経費、ビタミンB6（PLP）試薬やALT測定に係る費用などがまだ十分に計上できていないため