2022 Fiscal Year Annual Research Report
FTLDスペクトラムにおける核内RNP複合体の機能変化に基づく核酸医療の開発
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21H02838
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
石垣 診祐 滋賀医科大学, 神経難病研究センター, 教授 (40378170)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
増田 章男 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (10343203)
藤岡 祐介 名古屋大学, 医学系研究科, 特任助教 (70896381)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | FTLD / FUS / SFPQ / 核酸医薬 / RNP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1）FTLDスペクトラム疾患におけるFUS/SFPQ関連RNP複合体profile変化の解明：これまでに神経細胞核内FUS/SFPQ複合体には家族性ALSの原因遺 伝子であるEWSR, MATR3など多くのRNPが含まれ、これらのALS関連RNA結合タンパク質もFUS、SFPQと同様にタウisoformを制御することを、剖検脳を用いた疾患横断的解析と神経細胞を用いた発現抑制実験を通じて見出した。FUS/SFPQ関連RNP複合体の結合様式がFTLDスペクトラムでどのように変化しているか、剖検脳に加えて脊髄を用いた生化学的、免疫組織化学的解析からRNP profileを比較し、FUS、SFPQをはじめとしたRNPの変化が、海馬、前頭葉および脊髄の運動ニューロンレベルで変化していることを明らかにした。FUSのin vitroにおける液液相分離の評価系を構築し、ALS関連変異体でphase separationに変化が起き、dropletを形成することを確認し、同様のALS関連変異体を培養神経細胞に発現させることでRNA凝集体を形成して評価系として機能することを確認した。2）MAPTの選択的スプライシングに関与するRNPについて患者由来iPSC由来神経細胞を用いて、FUSとSFPQの局在変化を評価したところ、患者由来iPSC由来神経細胞ではそのisogenicな野生型と比較して局在性が低下していることを見出した。3）核酸医薬によるFTLDスペクトラム治療法の確立：上記までの病態メカニズム解析によって網羅的に同定したFUS/SFPQ関連RNP複合体のprofile（RNPの組み合わせ）変化、およびその標的RNA代謝変化をもとに、制御可能なoligonucleotideについてのスクリーニングを行って、候補となる核酸配列を同定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
FUS/SFPQ関連RNP複合体の結合様式について、免疫組織化学実験を行ったあとのシグナルの定量解析が抗体のロット不良に関連したトラブルシュートが必要となり、遅延した。
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| Strategy for Future Research Activity |
論文化に必要なデータの収集を急ぎ、論文化を目指す。
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[Journal Article] Actin-binding protein filamin-A drives tau aggregation and contributes to progressive supranuclear palsy pathology2022
Author(s)
6.Tsujikawa K, Hamanaka K, Riku Y, Hattori Y, Hara N, Iguchi Y, Ishigaki S, Hashizume A, Miyatake S, Mitsuhashi S, Miyazaki Y, Kataoka M, Jiayi L, Yasui K, Kuru S, Koike H, Kobayashi K, Sahara N, Ozaki N, Yoshida M, Kakita A, Saito Y, Iwasaki Y, Miyashita A, Iwatsubo T
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Journal Title
Science Advances
Volume: 8
Pages: 1-16
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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