2022 Fiscal Year Annual Research Report
播種性癌に対する革新的な自殺遺伝子ウイルス療法の開発
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21H03012
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
久保 秀司 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (10441320)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中込 隆之 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80434950)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | がんウイルス療法 / 増殖型レトロウイルスベクター / 自殺遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1、皮下腫瘍モデルでの治療実験
ヌードマウスに腫瘍細胞株を皮下移植し、1週間後、自殺遺伝子であるシトシン脱アミノ化酵素(CD)あるいはヘルペスウイルス由来チミジン キナーゼ(TK)を発現するRRV(AMLV-CD、GALV-CD、AMLV-TK, GALV-TKの4群)を感染させたMSCを尾静脈内投与した（MSV/RRV群）。対照群として、PBS投与群、RRV単独投与群を設けた。投与１週間後から薬物前駆体である5-フルオロシトシン(5-FC)あるいはガンシクロビル(GCV)を隔日投与し、定期的に腫瘍径を測定し抗腫瘍効果を比較検討したところ、MSV/RRV群はRRV単独投与群に比べ、有意な腫瘍増大抑制効果を認めた。
2、腹腔内播種モデル（非腹水）での治療実験
ヌードマウスの腹腔内にmCherry標識腫瘍細胞株を移植する。1週間後に自殺遺伝子搭載RRVを感染させたMSCを担癌マウスに腹腔内投与した（MSV/RRV群）。対照群として、PBS投与群、RRV単独投与群を設けた。投与１週間後から薬物前駆体を隔日投与したところ、MSV/RRV群、RRV単独投与群共に、PBS投与群に比べ有意な生存期間の延長、及び腫瘍増大抑制効果（in vivoイメージング解析結果）を認めた。
3、高悪性度並びに腹水産生腫瘍細胞株の作製
複数種のmCherry標識腫瘍細胞株を各々ヌードマウスの腹腔内に移植し、腫瘍形成を観察する。腫瘍から細胞を単離・培養し、再びヌードマウスの腹腔内に移植する。以上の過程を現在繰り返すことで (in vivo passage)、腫瘍の形成能、増殖速度が早く、また腹水産生を伴うような悪性度の高い腫瘍細胞株を作製することを目指しているところである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通り、動物実験での有効性を示すことができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
1、腹水を伴う腹膜播種モデルの作製とMSCを媒体とした腫瘍へのにRRV送達法の検証
ヌードマウスの腹腔内にmCherry標識腫瘍細胞株を移植する。担癌マウスにRRVを不活化する補体を含む腹水を再現するため腫瘍移植1週間後に10％ヒト血清／PBSを1mL腹腔内投与する。引き続きルシフェラーぜ発現RRVを感染させたMSCを腹腔内投与した（MSV/RRV群）。対照群として、PBS投与群、RRV単独投与群を設けた。in vivoイメージングをにより、腫瘍内におけるRRV伝播効率を比較評価する。
2、腹水産生腹膜播種モデルにおける治療実験
上記同様のモデルにおいて、自殺遺伝子搭載RRVを用い、治療実験を行う。抗腫瘍効果の判定には、体重、腹水量、in vivoイメージング解析結果、病理組織学的所見を比較検討する。また生存期間の差異についても検討する。
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